[发明专利]适合细胞生长的多孔径组织工程脚手架的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织工程学的医学组织工程材料，尤其涉及适合细胞生长的多孔径组织工程脚手架的制造方法。

背景技术

组织工程是指应用生命科学与工程学的原理和方法来设计、组建、维护人体细胞和组织的生长，以恢复受损伤的组织或器官的功能。组织工程的发展为组织或器官的修复与再建提供了可能。组织工程材料也日益受到人们的重视，研究开发具有良好组织相容性的材料已成为组织工程发展的基石。

以前的脚手架一般为颗粒状、线条状结构，不具有多孔空间立体架构。另外，以前的脚手架常常组织相容性不好、或具有一定毒性、或不能可完全降解，或吸水度不好。这样的脚手架不利于细胞在一定的空间架构中生长，不利于它们的相互作用和细胞通讯，不符合在机体中实际的自然状态。

发明内容

本发明解决的问题是现有的脚手架不具有多孔空间立体结构的问题。

为解决上述问题，本发明提供一种适合细胞生长的多孔径组织工程脚手架的制造方法，该方法包括如下步骤：(1)、明胶0.3-1.0g，透明质酸钠1-8mg和软骨素6-磷酸钠盐0.05-0.5g溶解在5-10ml双蒸水中而构成溶液；(2)、用1-5mL0.5-5％EDC加入所述溶液中混匀；(3)、在室温放置1-10min，然后在-20℃冷冻0.5-3h，-60～80℃再冷冻0.5-3小时；(4)、最后经-50℃冻干机条件下冻干48-96小时以得到初步脚手架；(5)、将所述初步脚手架和5-20mL 0.1-0.5％EDC在室温作用12-48h；(6)、再在-20～-30℃的条件冷冻12-48h后，最后，在-50℃冻干机条件下冻干48-96小时，制得脚手架。

在进一步方案中，所述明胶的数值范围是0.4～0.7g、透明质酸钠的数值范围是3～8mg、软骨素6-磷酸钠盐的最好范围是是0.2～0.4g或双蒸水的数值范围是7.0～8.5ml。

在进一步方案中，在步骤2中所述EDC的数值范围是1.5～2.5ml。

在进一步方案中，在步骤3中，所述在室温放置时间是2～5min、在-20℃冷冻放置时间的数值范围是1.5～2.5h或在-80℃冷冻放置时间的数值范围是1.5～2.5h。

在进一步方案中，在步骤4中-50℃的条件下冻干时间的数值范围是64～80h。

在进一步方案中，在步骤5中，EDC的数值范围是8～13ml、在室温放置时间的数值范围是18～30h。

在进一步方案中，在步骤6中，在-20℃冷冻在室温放置时间的数值范围是18～30min或在冻干时间最好的数值范围是64～80h。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

由于本发明采用上述制备条件并将各成分控制在上述范围内，所以，制得的工程脚手架具有多孔海绵状空间立体架构、组织相容性好、质地好、孔径大小合适以及吸水度好，而且，由于采用所述材料，所以，没有毒性也可完全降解。

附图说明

图1是本发明适合细胞生长的多孔径组织工程脚手架的制造方法的流程图；

图2是通过本发明的方法制造的一种工程脚手架的结构图，该图显示工程脚手架铂金喷镀后扫描电子显微镜放大2000倍照片，该照片显示本材料呈光滑的多孔海绵状空间构架，标尺20um，P为海绵多孔结构，孔径均匀，表面光滑，经测量孔径大小为60-80um。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所达成目的及功效，下面将结合实施例并配合附图予以详细说明。

请参阅图1，本发明适合细胞生长的多孔径海绵状组织工程脚手架包括如下步骤：

(1)、明胶0.3-1.0g，透明质酸钠1-8mg和软骨素6-磷酸钠盐0.05-0.5g溶解在5-10ml双蒸水中而构成溶液；

在该步骤中，当明胶小于0.3g时，脚手架质地会太软，不易冻干成型，无法形成多孔状结构，孔径大小合适；当明胶大于1.0g时，脚手架质地太硬而脆，吸水度变差。在本发明中，明胶为0.3g、0.35g、0.4g、0.42g、0.47g、0.5g、0.53g、0.57g、0.59g、0.65g、0.7g、0.75g、0.78g、0.81g、0.84g、0.89g、0.92g、0.95g、0.97g或者1.0g，明胶最好的数值范围是0.4～0.7g，在该范围内脚手架质地和吸水度合适。