[发明专利]靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属药物制剂领域，涉及一种靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物及其制备方法和应用，具体地涉及靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物在药物传递系统中同时运载抗癌多肽和基因/化疗药物中的应用。

背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病。癌症治疗是目前世界性难题。化疗作为临床治疗癌症的重要手段，已成为目前临床治疗恶性肿瘤最直接有效的方法之一。然而由于化疗药物的高毒性和重复使用易诱导肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药性（Multi-Drug Resistance，MDR），严重影响着临床化疗效果，90%以上肿瘤死亡患者都与不同程度的耐药相关。逆转肿瘤细胞的耐药性，提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，对肿瘤治疗意义重大。

MDR的产生和多药耐药基因编码的P-gp（P-glycoprotein）膜蛋白等外排蛋白和Bcl-2等抗凋亡蛋白过度表达有关。有研究显示，下调或阻断MDR表达可显著增强肿瘤细胞的化疗敏感性，逆转多药耐药。针对肿瘤细胞耐药基因的siRNA干扰技术在体外细胞水平取得了较好的较果，RNA干扰技术具有高效、低毒、特异性强的特点，其中TKM-PLK1、ALN-VSP和Atu027的siRNA均已进入I期临床用于实体肿瘤治疗。利用siRNA技术沉默MDR耐药基因，抑制相关蛋白表达，联合化疗药物是提高肿瘤对化疗药物敏感性最有效的手段之一。

近年来，联合化疗药物/基因药物共输送（co-delivery）用于肿瘤治疗策略逐渐引起人们的关注。已有明确实验证据表明化疗药物与基因药物联合应用可以依据二者对肿瘤细胞作用部位和作用机制不同实现对肿瘤细胞协同杀伤和增殖抑制的功能，补充单纯化疗药物作用靶点单一的不足，减小化疗药物剂量，降低毒副作用。阳离子脂质体在所有已用于临床试验的基因载体中仅次于病毒载体居第二位，是最有发展前景的非病毒载体，特别适用于带负电荷的DNA/RNA和亲水性/或疏水性化疗药物的共输送。然而阳离子脂质体用于共输送传递载体在应用上仍面临问题，主要表现在：（1）对病灶部位微环境响应能力不强，影响药物递送效率。（2）组织选择性不理想，缺少只针对肿瘤细胞的特异性靶点。如何提高载体的靶向效率及其递送效率，探寻新型的特异性靶点，最终实现理想靶向药物传递，是肿瘤靶向共输送药物载体设计面临的重要科学问题。基于目前载体存在的关键问题，迫切需求新型靶向共输送药物传递载体。

采用同时具有PEG链的引入不影响共输送药物的包载、主动靶向至肿瘤组织、受肿瘤微环境触发脱去PEG长链、入胞前电荷反转为带正荷等多重功能于一身的共输送药物载体未见诸于国内外相关文献报道。

发明内容

本发明所解决的技术问题在于提供一种靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物。

本发明同时提供了靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物的制备方法和在靶向纳米递药系统中的应用。该系统通过复合机制介导，将具有特异靶向识别、信号传导阻断、pH触发断裂引起电荷反转、逆转MDR、能同时包载化疗药物或诊断药物和基因药物等复合机制介导自组装共输送药物传递纳米递药系统。

本发明的纳米递药系统能够将基因药物和化疗药物同时递送到靶细胞内，并通过静脉注射给药途径发挥协同治疗癌症的作用。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明的靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物的结构式为R-PEG-Z–R₁，其中R代表甲基、anti-EphA10抗体、小分子配体、多肽配体和核酸适体中的一种,优选抗EphmAb、叶酸、甘草次酸、RGD、生物素；

Z代表各种pH敏感键，主要为腙键、乙烯醚键、二硫键、酯键、原酸酯键、缩酮键、酰胺键，为以下结构中的一种：

R₁胆固醇、α-生育酚的一种，为以下结构的一种：

其中PEG分子量范围2000-5000。

本发明分三步合成了靶向配体-PEG-胆固醇/生育酚衍生物：

①靶向配体-PEG衍生物的合成。

靶向配体-PEG衍生物包括：“anti-EphA10抗体-PEG衍生物”、“小分子配体-PEG衍生物”、“多肽配体-PEG衍生物”、“核酸适体-PEG衍生物”。其结构式为R-PEG-X，其中R代表甲基、anti-EphA10抗体、小分子配体、多肽配体和核酸适体中的一种。X代表功能基团，具体是指羟基、巯基、羧基、磺酸基、氨基、酰氯、酸酐、醛基和马来酰亚胺等中的一种。