[发明专利]一种基于稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法

说明书

技术领域

本发明属于药材鉴别领域，具体涉及一种冬虫夏草的产地鉴别方法。

背景技术

冬虫夏草是我国青藏高原地区的珍稀物种资源，具有提高人体免疫力、抗肿瘤等保健功能和特殊药效，其有效作用在民间已得到广泛的认可。

冬虫夏草的产地属性是衡量其价值的重要指标，不同产地的冬虫夏草在营养成分和功能上具有明显差别，价值上也存在差异。然而我国尚缺乏冬虫夏草产地有效鉴别的技术手段和方法，仅仅依靠企业自律和现有的标准管理体系无法有效规范市场，极少部分企业受到利益驱动，利用假冒伪劣冬虫夏草冒充优质产地冬虫夏草，获取高额利润，对冬虫夏草市场造成较大冲击，不利于我国冬虫夏草产业的良性发展和有序竞争，同时损害了消费者的利益和知情权。因此开发一种能够有效鉴别冬虫夏草产地的技术方法对于规范市场行为，促进我国冬虫夏草产业健康发展，维护合法企业和消费者利益具有十分重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于冬虫夏草原冬虫夏草产地鉴别的可靠方法。

为达到上述目的，本发明的发明人经过多年研究发现，不同地区的冬虫夏草在形成过程中，不断与外界环境进行物质交换，从冬虫夏草侵染幼虫到菌丝长满幼虫虫体的整个过程中，虫草处于土壤下，其体内物质组成受当地土壤影响较大，待虫草长出子座后与空气直接接触，受到当地空气、雨水等其他环境因素的影响，冬虫夏草体内同位素（如N）受土壤、空气、气候条件等因素影响而发生自然分馏效应，导致不同产地冬虫夏草体内同位素自然丰度的差异；成熟冬虫夏草的同位素丰度在一定程度上能够反映所处环境的同位素特征。因此利用稳定同位素比值质谱检测冬虫夏草中氮稳定同位素的比值差异可鉴别不同产地的冬虫夏草。

本发明采用稳定同位素比值质谱仪对来自真实产地的冬虫夏草中氮同位素比值进行了测定，通过对待测冬虫夏草样品进行氮稳定同位素比值测定，然后将待测样品氮稳定同位素比值与参考的真实产地冬虫夏草氮稳定同位素比值进行显著性差异分析，若无显著差异则表明待测样品与真实样品来自于同一产地，反之则表明来自不同的产地。

优选的，在实施本发明过程中，可构建真实产地冬虫夏草δ¹⁵N值数据库，从而在使用本发明的方法鉴别冬虫夏草产地时，不需要每次都测定真实产地冬虫夏草δ¹⁵N值，而是使用已经建立的真实产地冬虫夏草δ¹⁵N值数据库。

当然，本领域技术人员可以选择在同一检测周期内，既测定真实产地冬虫夏草δ¹⁵N，有测定待测样品中的δ¹⁵N。

优选的，本发明的真实产地冬虫夏草样品是从冬虫夏草主产区实地采集获得的真实样品。

本发明的真实产地冬虫夏草δ¹⁵N值数据库可通过如下方法构建：采集样品，其中任一产地至少采集10个以上不同草甸的样品，然后测定样品的δ¹⁵N值，建立真实产地冬虫夏草δ¹⁵N值数据库，其中采用统计学方法分析原产地样品的δ¹⁵N值与产地的相关性。

本发明中样品的δ¹⁵N值测定方法为：取冬虫夏草样品1根（0.2-0.4g），采用组织粉碎仪将样品粉碎为粉末状，组织粉碎仪粉碎条件为1600 rpm，5 min，先经过元素分析仪转化为纯净的N₂气体，再经过型号为稀释仪，最后进入质谱仪进行检测。元素分析仪工作参数为：进样器氦气吹扫流量为 200ml·min^-1，氧化炉温度为980℃，还原炉温度为650℃，载气氦气流量为 90 ml·min^-1。稀释仪条件设定：氦气稀释压力为 0.6 bar，N₂参考气压力为 0.6 bar。

    本发明经过充分的前期试验摸索和优化，发明的方法稳定可靠，且无需复杂的前处理过程，操作简单，成本低，解决了冬虫夏草产地鉴别的技术问题，有利于促进冬虫夏草产业的健康发展，具有良好的应用前景。

 

附图说明

附图1 不同产地冬虫夏草样品δ¹⁵N统计，其中QH代表青海，SC代表四川，YN代表云南，NBR代表尼泊尔

具体实施案例

下面结合实施案例对本发明进行具体说明，实施案例是为了进一步阐述本发明，而不会给本发明造成任何限制。

实施例一： 真实产地冬虫夏草样品的δ¹⁵N测定

1.1 真实产地样品的采集