[发明专利]一种靶向HIF低毒性的磁性纳米棒的制备方法

权利要求书

1.一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：

(1)Fe₃O₄表面修饰制备Fe₃O₄-ILs

将氨基功能化磁性纳米离子Fe₃O₄和4-乙酰基吡啶-2溴丙酸乙酯按质量比为18:1~18:3混合溶解于二甲基二乙酰胺后转入三口烧瓶中，按与混合液体积比为4:3-4:10加入乙醇，搅拌6~20 h，转入60℃水浴中回流2-6 h； 分别加入与反应液体积比为1:1~4:1的丙酮促降，离心分离，得到溶解性好的Fe₃O₄-ILs；

(2) Fe₃O₄-ILs-DNA1或 Fe₃O₄-ILs-DNA2的制备：

1)配制2 mg/mL Fe₃O₄-ILs磷酸盐缓冲溶液（10 mM，pH=7.4）中，分散均匀

2)按与Fe₃O₄-ILs质量比为1:500~4:500，向其中滴加DNA1(或DNA2) (100 uM）PBS 溶液，搅拌均匀；

3)将混合溶液置于摇床室温摇动1~4 h，

 4)离心分离得黑色纳米颗粒Fe₃O₄-ILs-DNA1或 Fe₃O₄-ILs-DNA2；

(3)磁性纳米棒(Fe₃O₄-ILs-DNA)的制备：

将制备好的Fe₃O₄-IL-DNA1和Fe₃O₄-IL-DNA2以质量比1:2~2:1，混合均匀，于水浴中加热到1~60^oC，稳定1~6 min 缓慢冷却到室温1~3 h，离心分离得磁性纳米棒Fe₃O₄-ILs-DNA，样品 放于冰箱中4℃储存。

2.根据权利要求1所述的一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于其中所述的DNA1的序列为CTACGTGCT。

3.根据权利要求1所述的一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于其中所述的DNA2的序列为AGCACGTAG。

4.根据权利要求1所述的一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于步骤(1)中4-乙酰基吡啶-2溴丙酸乙酯按质量比为18:2，乙醇与混合液体积比为4:6，搅拌12 h，转入60℃水浴中回流6 h，分别加入与反应液体积比为2:1的丙酮。

5.根据权利要求1所述的一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于步骤 (2)磷酸盐缓冲溶液浓度为10 mM，pH=7.4，按与Fe₃O₄-ILs质量比为500:2向其中滴加DNA1或DNA2，将混合溶液置于摇床室温摇动2 h，步骤(3)制备好的Fe₃O₄-IL-DNA1和Fe₃O₄-IL-DNA2的质量比为1:1混合均匀，于水浴中加热到30^oC，稳定3 min，3h缓慢冷却到室温。