[发明专利]一株DDT和DDE降解菌DXZ9

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一株DDT和DDE降解菌DXZ9，具体涉及一株DDT和DDE降解菌——寡养单胞菌属（Stenotrophomonas sp.），属于生物降解处理技术领域。

（二）背景技术

DDT(2,2-bis(4-Chlorophenyl)-1,1,1-trichloroethane)分子式：C₁₄H₉Cl₅，别名2,2-双(4-氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(p,p'-DDT)；DDE（1,1-dichloro-2,2-bis(p-chlorophenyl)ethylene）作为DDT的一种好氧代谢产物，但DDE比DDT持久性更强，所以尽管DDT已被禁用很多年，但其降解产物DDE仍然在环境中存在。分子式：C₁₄H₈Cl₄，别名2,2-双-(对氯苯基)-1,1-二氯乙烯。其结构式如下：

纯p,p'-DDT为白色结晶，熔点为108.5～109℃，凝固点在87℃以上，不溶于水，可溶于大多数有机物或氯化溶剂。

虽然DDT在我国已经禁用多年，但DDTs在环境中的残留浓度依然居高不下，DDTs在南京不同地区土壤中的检出率为100%，残留量在0.148～0.26mg·kg^-1之间。大部分样点土壤中可能有新的DDTs污染物的输入。在北京的官厅水库区域的表层土壤中都有有机氯农药的存在，DDT含量占总有机氯农药的93%。主要有两个原因，第一污染来源主要来自80年代大量有机氯农药的使用在环境中的残留，即历史上的使用引起的；第二来自农药三氯杀螨醇的生产和使用。DDT在土壤环境中消失缓慢，一般情况下，约需10年。大部分DDT存在于地表层2.5cm深的土壤内，在温带环境中的半衰期可达2.3～30年，在热带雨季时DDT在大田土壤中的半衰期是234～317天。DDTs在全球范围的各种环境介质(海洋、底泥、大气、江河、土壤等)、动植物组织器官及其人体中广泛存在，己经引起了各界人士和公众的广泛关注，逐渐成为一个全球性环境问题。DDT对生物的神经系统、生殖系统、免疫系统、内分泌系统均会产生影响，由于DDT和其代谢产物具有高脂溶性、持久性和稳定性，通过食物链产生生物放大作用，其对生态环境和人体健康的潜在风险一直是人们关注的焦点。

利用微生物修复技术因具有成本低、环境影响较小、微生物生命力极强、可大面积应用等独特优点而越来越受到人们的重视，是目前最具潜力的土壤修复技术之一。迄今，国内外一些研究学者已筛选到多株DDT降解菌，但DDE降解菌较少，本研究涉及的寡养单胞菌属是首次被发现对DDT和DDE均有较好的降解能力的菌株。

（三）发明内容

为了解决上述问题，本发明从农药的生产污水处理厂采集分离得到了一株DDT和DDE降解菌DXZ9，属于寡养单胞菌属，经实验证明其对DDT和DDE均具有降解能力。

一株DDT和DDE降解菌DXZ9（Stenotrophomonas sp.DXZ9），已于2013年6月28日保藏于中国武汉典型培养物保藏中心（简称CCTCC），保藏号为CCTCC No：M2013304。保藏地址：湖北省武汉市珞珈山武汉大学；邮编：430072。

所述一株DDT和DDE降解菌DXZ9形态特征如下：呈短杆状，不产芽孢，带有着生鞭毛；革兰氏染色反应阳性，吲哚、硝酸盐还原、D-阿拉伯糖、木糖发酵、乳糖发酵、甘露糖发酵试验均呈阴性。

以DDT和DDE降解菌DXZ9的总DNA为模板，利用细菌16S rDNA通用引物（27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG,1392R:ACGGGCGGTGTGTAC）进行PCR扩增，得到约为1500bp的扩增产物，测序由上海生工完成，其16s rDNA序列如SEQ ID.NO1所示。

根据Gene Bank序列同源性比较，菌株DXZ9与Stenotrophomonas maltophilia同处于一个最小的分支，同源性达到91%。结合菌株的生理生化特征，将菌株DXZ9初步鉴定为寡养单胞菌属，命名为DDT和DDE降解菌DXZ9（Stenotrophomonas sp.DXZ9）。