[发明专利]一种检测多巴胺的电化学适配体传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种检测多巴胺（DA）的电化学适配体传感器，其特征在于，包括以下步骤：

（1）酰胺-胺树状大分子-纳米金（PAMAM-GNPs）复合物的制备：

将2.5 mL HAuCl₄ 溶液（0.3 mmol/L）添加到2.5 mL0.1 mmol/L 酰胺-胺树形分子（PAMAM）（取0.15 μL树状分子加2.5 mL水）溶液中，搅拌20 min；将2.5 mL柠檬酸钠（0.1 mmol/ L）逐滴加入上述溶液中，反应时间为4 h后，溶液颜色变为深红色，形成零价金配合物；另外，在PAMAM中加入不同体积的氯金酸可以得到不同大小粒子的 PAMAM-GNPs复合物，同时加入过量还原剂，使大部分氯金酸被还原为金纳米粒子。

2.（2）铁氰化镍（NiHCFNPs）纳米粒子的制备：

将35 mL 0.01 mol/L的NiCl₂逐滴加入到35 mL含有0.05 mol/LKCl的0.05 mol/L K₃Fe(CN)₆溶液中，搅拌；当完全加入之后，大力搅5 min，之后用微孔膜（0.4 μm）过滤；收集沉淀，用蒸馏水冲洗，再过滤，室温下真空干燥；得到粉末物质即为铁氰化镍纳米粒子。

3.（3）一种检测多巴胺（DA）的电化学适配体生物传感器的制备方法，步骤如下：

取10 μL酰胺-胺树形分子复合物修饰到金电极表面，过夜晾干；通过静电吸附将铁氰化镍纳米粒子吸附到电极上；接着电沉积一层金纳米粒子；将修饰好的电极浸入到多巴胺-适配体溶液中，培养10 h之后；将上述电极用PBS缓冲液清洗，然后取10 μL多巴胺溶液修饰到电极上，培养60 min；电极在PBS 为7.2的缓冲液中扫描循环伏安图，记录电流信号的变化。

4.设置参数：扫描电压：-0.2到0.6 V，扫描速率：50 mV/s，扫描圈数：3圈。

5.如权利要求1所述的制备一种检测多巴胺（DA）的电化学适配体传感器，用于多巴胺的检测步骤如下：

（1）以Ag/AgCl为参比电极，以Pt电极为对电极，电化学适配体传感器为工作电极，连接到电化学工作站，在pH为7.2的磷酸缓冲溶液（PBS）中，扫描电位为-0.2到0.6 V，扫描速率：50 mV/s，检测传感器修饰多巴胺（DA）前后的电信号变化与DA浓度的关系，绘制工作曲线；

（2）将待测样品溶液代替多巴胺（DA）标准溶液，按照工作曲线的绘制方法进行检测。