[发明专利]一种液氮技术制备发酵剂的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品工业领域，特别涉及一种液氮技术制备发酵剂的方法。 

背景技术

对于酸奶制作的研究，从最初的开始使用天然的混合菌株制备酸奶等乳制品，到筛选出性状优良的发酵菌种制备纯菌种液体发酵剂，再发展到现在易于保藏和运输的高效冻干直投式发酵剂的出现，标志着酸奶发酵剂研究的三个时代的更替。欧美许多国家在20世纪初就已经开始对发酵剂进行研究， 

至今在发酵剂的领域中已取得举世瞩目的成就，浓缩发酵剂已实现了专业化、商品化生产，并成功的应用于发酵乳制品的生产以及保健型乳酸菌制剂的研制，涌现出一批知名的实力强劲的发酵剂制造商，如丹麦的科汉森公司和法国的罗地亚公司等。最初研制成的是冷冻浓缩乳酸菌发酵剂，即将乳酸菌通过浓缩培养、离心收集等手段制成高浓度菌体的浓缩型菌悬液，添加抗冻保护剂后在低于-70℃的低温条件下速冻，再置于低温下深冻保藏而成。 

伴随真空冷冻干燥技术的日益成熟，在九十年代初，又相继开发出了浓缩型的真空冻干发酵剂，即将冻结后的浓缩菌悬液通过添加冻干保护剂，在真空低温的条件下将水分升华干燥，制成干燥粉末状的固体发酵剂，也叫直投式发酵剂(Directvatset，DVS)。这种发酵剂具有较多优点：菌种活力强，浓度高，菌数能高达10¹⁰～10¹²cfu/g、发酵性能稳定、生产工艺易于控制，生长周期较短、保藏方便、在4℃常压保藏1年以上仍然具有很强的活力、体积较小，运输方便等等。因此随着直投式发酵剂的出现，酸奶产业得到了进一步的加速发展越来越多的发酵乳生产厂家开始使用浓缩型冻干发酵剂，其中也包括国内大多数大规模的乳制品公司；而我国由于起步较晚，研究水平还与西方国家有一定的差距，但随着国内乳制品市场需求量逐年增长，许 多科研部门和高校实验室都开始加紧对乳品发酵剂的研究和生产，并取得了一定的进展。 

发酵剂中的性状优异的乳酸菌菌种是制备高品质酸奶的关键，保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)是发酵剂中的常用菌种。随着对酸奶益生作用的越来越重视和对乳酸菌菌种研究的深入，嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)和双歧杆菌(Bifidobacterium)也越来越多的应用在酸奶发酵剂中。另有一些益生菌发酵乳制品已经成功的推向市场。如芬兰Valio公司开发的L.GG，法国达能公司开发的L.casei Immunitas，法国罗地亚公司开发的L.acidophilus NCFM，日本Yakult公司开发的L.casei Shirota，丹麦汉森公司的L.acidophilusLA-1和LA-2，光明乳业股份有限公司的具降高血压功能的Lactobacillus casei LC2W（EP1642963B1）、降血脂功能的Lactobacillus casei BD-Ⅱ（US Patent7270994），降血清胆固醇功能的Lactobacillus plantarum ST-III（ZL200410066891.7、ZL03116377.7）等。 

全球益生菌市场年增长率达9%，中国地区销售额达到50亿欧元，占全球市场份额的四分之一。但我国发酵乳制品行业直投式发酵剂市场长期为国外发酵剂公司所垄断，益生菌发酵剂市场更是为国外公司所完全占有。 

另外，真空冷冻干燥发酵剂具有活菌含量高、易保存管理、更强的稳定性和乳酸菌活力的特点，可直投式使用，是当今发酵剂的主要产品形式。但是，由于在冻干过程对菌体产生损伤，且能耗较大等因素，冻干菌粉菌株存在复活时间较长和成本较高的弊端，对于发酵剂制备需要寻求一种菌体受损伤较小的试验方法和工艺，来优化完善直投式发酵剂的工业制备。使用液氮冷冻浓缩造粒，发酵剂制备工艺方面较冷冻干燥技术简单方便，且耗时较短，制备的发酵剂均复水性较佳，结构较为均匀；在菌体存活率方面，使用保护液制备的液氮菌粒较冻干菌粉有显著优势，能够避免冻干过程中对菌体的损伤。 

发明内容

本发明的目的是提供一种新的液氮技术制备多联发酵剂的方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。 

本发明中，所述的制备方法优化了液氮技术制备多联发酵剂的方法，保证制备的发酵剂的乳酸菌有较高存活率，制备工艺较为简便，且获得的发酵剂颗粒均匀、外形较佳，有利于改善国内发酵剂市场同质化现象。 

本发明提供的技术方案是：一种如前所述的液氮技术制备多联发酵剂的方法，所述的制备方法包括如下步骤： 

(1)分别对单个菌种进行扩大培养；