[发明专利]一种枇杷叶的乙醇提取物及其制备、检测方法和用途

说明书

[技术领域]

本发明涉及枇杷叶提取物、方法和应用，具体涉及一种枇杷叶的乙醇提取物及其制备、检测方法和用途。

[背景技术]

枇杷叶为蔷薇科植物枇杷Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.的干燥叶。具有清肺止咳，降逆止呕的功效,临床用于治疗肺热咳嗽，气逆喘急，胃热呕逆，烦热口渴。其主要分布于我国中南及江西、福建、江苏、浙江、陕西、甘肃等地。化学成分主要有黄酮类、多酚类、倍半萜及其苷类等，具有镇咳、祛痰、平喘、抗菌等作用。

国内发明申请CN1939443A公开了一种枇杷叶提取物的制备方法和用途，该提取物主要采用极性有机溶剂提取，如甲醇、乙醇、丙醇等，得到的提取物能制作成药剂，并具有化痰、止咳、平喘、消炎、抗病毒和降血糖。

[发明内容]

为了提取一种能够治疗肿瘤的枇杷叶有效成分，本发明提供了一种枇杷叶的乙醇提取物及其制备、检测方法和用途。

为实现上述目的，设计一种枇杷叶的乙醇提取方法，包括以下步骤：

a.枇杷叶用石油醚浸泡18～36h，每100g枇杷叶需要300～800ml的石油醚，然后渗滤回收残渣；

b.所述的残渣用70～90%的乙醇提取浓缩，浓缩后的浓缩液相对于于乙醇的密度为1.15～1.20，即为枇杷叶乙醇提取物.

上述制备方法还具有如下优化方案：

所述的步骤（b）中，乙醇提取的次数为2次，每次提取时间为2小时，合并2次提取液进行所述的浓缩。

所述的步骤（b）中，乙醇的浓度为80%。

步骤（a）中，所述的枇杷叶先经过粉碎，粉碎后的粒径为250～850μm。

步骤（a）中，所述的浸泡，需要的时间为24h。

一种用上述方法提取得到的枇杷叶乙醇提取物，其特征在于所述的枇杷叶乙醇提取物主要成分为三萜类和酚类。具体为酒石酸、金丝桃苷、5,5’-二羟基-3’-甲氧基-2-O-β-D-吡喃葡萄糖基联苯、山香二烯酸、正十三烷酸、2α-羟基熊果酸、苹果酸、熊果酸、齐墩果酸、表儿茶素、儿茶素和正二十一烷醇。

一种药物制剂，由上述的姜黄的乙醇提取物和药学上可接受的载体组成。

所述的制剂为片剂、散剂、片剂、胶囊或口服液。

一种检测上述枇杷叶的乙醇提取物的方法，用超高效液相色谱-电喷雾串联质仪对所述枇杷叶提取物进行分析，以获得枇杷叶乙醇提取物的UPLC-Q-TOF-MS图谱，

a.质谱条件为：ESI离子源，正离子模式检测；雾化器N2压力为50psi；干燥气N2流速为15L/min；质量扫描范围50～1200；自动3级质谱；

b.色谱分析条件为：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC^TM BEH C18Column(50mm×2.1mm.i d.,1.7μm)；二元梯度洗脱，A相为0.1%甲酸水溶液；B相为乙腈，流速为0.3mL/min，梯度洗脱的程序如下：90%A相，逐渐减少A相比例，至14min时A相比例为0，保持2min，流速：0.3mL/min；进样量3μL。

本发明首次提供了枇杷叶提取物在制备肿瘤的药物中的应用，并且提供了应用超高效液相色谱-质谱联机分析技术及结果构建枇杷叶提取物指纹图谱的方法。该方法包括枇杷叶提取物的UPLC-MS分析条件。色谱峰的特征、色谱组分的质谱提供的化合物结果信息等。本发明公开的指纹图谱及其技术可用于枇杷叶的品种鉴别及枇杷叶提取物的质量监控。

[附图说明]

枇杷叶UPLC-Q-TOF/MS正离子模式下总离子流图。

[具体实施方式]

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，结合附图对本发明进行进一步详细说明。本申请中的生产设备都是本领域的常用设备，应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：

枇杷叶的乙醇提取物

由以下方法制备：枇杷叶粉碎，过35目筛得到粒径为250μm的枇杷叶颗粒，称取枇杷叶颗粒500g，用2000ml石油醚渗滤，先用石油醚浸泡18h，至渗漉液颜色变浅（渗滤液约为2500ml），回收残渣，挥干残渣中的石油醚，用70%乙醇提取2次，每次乙醇用量为2500ml，每次提取时间为2小时，合并提取液，将其减压浓缩至无醇味，相对密度为1.15-1.20，蒸干后得乙醇提取物。

实施例2

枇杷叶的乙醇提取物