[发明专利]一种木香乙酸乙酯提取物的检测方法

说明书

[技术领域]

本发明涉及木香乙酸乙酯提取物的检测方法，具体涉及一种联用UPLC和Q-TOF-MS来检测木香乙酸乙酯提取物具体成分的方法。

[背景技术]

木香，中药名。为菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根。始载于《神农本草经》列为上品,味辛苦,性温,具有行气止痛,健脾消食的功效,临床上用于胸脘胀痛、泻痢后重,食积不消,不思饮食等症,煨制后涩肠止泻,用于泄泻腹痛,为治疗腹痛、泻痢的常用药。《名医别录》称之为蜜香、青木香。李时珍谓:“昔人谓之青木香,后人因呼马兜铃根为青木香,乃呼此为南木香,广木香以别之。”在配方过程中,医生处方中常见有云木香,川木香,土木香,青木香,红木香及越西木香等带有“木香”之名出现,容易不致混淆。

木香的鉴别方法有性状鉴别、显微鉴别，具体为：

性状鉴别为：略呈圆柱形,枯骨形为纵剖片,长约5～15cm,直径0·5～6cm,表面黄褐色,栓皮多除去,有显著纵沟及侧根痕,有时可见不规则菱形网纹。质坚实,体重,不易折段。断面略平坦,黄白色至棕黄色,有一棕色环及放射性纹理,并可见散在的褐色油点。气强烈芳香,味苦。

显微鉴别为：1.横切面：木栓层为多列木栓细胞；韧皮部宽广,射线明显，成环状；木质部木质部导管单行径向排列，木纤维存于近形成层处及中心的导管旁,初生木质部多为四圆形；油室散在于薄壁细胞中,呈圆形或椭圆形,常贮有黄色油滴；薄壁细胞含有菊糖。2.粉末：菊糖极多；木纤维多成束长菱形,直径16～24Lm,纹孔口横裂孔状,十字状或人字状；导管主为网纹导管,也有具缘纹导管,直径30～90Lm；油室可见油室碎片,内含黄色或棕色分泌物；

木栓细胞淡黄棕色。表面观类多角形,大小不一,垂周壁微波状弯曲。

而关于木香提取物及有效成分的检测也很少有报道，例如：

国内申请201210425189X公开了一种木香的乙酸乙酯提取物，其制备方法为：木香用石油醚浸泡18-36h，渗滤提取至3-8倍药材量，回收残渣，挥干残渣中的石油醚，用70%-90%乙醇提取，提取液浓缩得乙醇浓缩液，用乙酸乙酯萃取，倒出上层，即得乙酸乙酯提取物。但是没有提及该产品的检测或鉴别方法。

UPLC/Q-TOF-MS分析方法是超高效液相色谱-四极杆联合飞行时间串联质谱分析方法，通过高效液相的联用，可以方便得到每个样品的主要结构信息，并针对每个组分进行准确的定性分析。四级杆质谱是在交变电场的作用下没事某些符合要求的离子通过四级杆到达检测器，飞行时间质谱（TOF）是应用不同的m/z离子的飞行速度不同，离子飞行通过相同的路径到达检测器的时间不同而获得质量分离。四级杆串联飞行时间质谱不仅用于一级质谱的分析而且可以实现二级质谱分析，一级质谱可得出化合物的分子量信息，二级质谱则可以得到化合物的碎片离子等结构信息。

目前，UPLC/Q-TOF-MS可以广泛运用中药化学成分的快速鉴定定性分析，它可以使样品的分离和定性及定量成为一个连续的过程，费时费力而且对环境不好，UPLC/Q-TOF-MS的快速分析鉴别，能够在短时有效成分分离的基础上，获得大量的化合物结构信息，在中药化学成分分析中发挥了重要的作用。

[发明内容]

为了弥补现有技术的不足，本发明提供了能够检测类似国内申请201210425189X的木香乙酸乙酯提取物的方法，并通过联用UPLC和Q-TOF-MS来实现。

为实现上述目的，设计一种木香乙酸乙酯提取物的检测方法，联用UPLC和Q-TOF-MS进行分析检测，所述的方法由以下步骤组成：

a.所述的UPLC分析的条件为：采用Waters ACQUITY UPLC^TM BEH C18Column(50mm×2.1mm.id.,1.7μm)柱进行二元梯度洗脱，A相为水溶液，B相为乙腈，流速0.3mL/min；进样量3～4μL；

b.所述的Q-TOF-MS分析的条件为：采用电喷雾电离源、TOF离子飞行和正离子模式检测，四级杆质量扫描范围为50～1200m/z，一次扫描时间为0.1s，离子源温度120℃，去溶剂温度300℃，锥孔气体流速为50L/h，脱溶剂氮气流速800L/h，正离子电离模式，毛细管电离电压3kV，锥孔电压40V，碰撞气体压力为2.5×10^-3Mbar，电子倍增器电压650V。

所述的梯度洗脱的具体优化步骤如下：

所述的进样量优选为4μL。

本发明提供的木香的乙酸乙酯提取物的检测方法具有以下优点：