[发明专利]一种溶栓豆豉的制备方法

权利要求书

1.一种溶栓豆豉的制备方法，其特征在于，其中所使用纳豆菌HT8保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCC 7168，毛霉从忠县忠州腐乳毛坯中分离获得，包括如下步骤：

步骤一、菌种活化：将斜面保藏毛霉菌种于无菌操作下接种到PDA斜面培养基，于恒温培养箱18-20℃培养72h，于冰箱中保存备用；吸取100uL纳豆菌HT8到10mL LB培养基，37℃，160r／min培养12h，于冰箱保存备用；

步骤二、毛霉种子液的制备：将PDA斜面培养基活化的毛霉菌种加入适量的无菌生理盐水，用移液器吸取适量菌液，接种于麸皮培养基，20℃下培养96h，至三角瓶内鼓皮长满菌丝和灰色孢子后取出备用，在培养好的种曲培养瓶中加入500mL灭菌生理盐水充分摇匀，双层纱布过滤，滤渣再加500mL灭菌生理盐水洗涤一次过滤，两次滤液混合制成孢子悬液，将此孢子悬浮液置于4℃冰箱中，作为菌种保存；

步骤三、纳豆菌种子液的制备：取200uL的活化纳豆菌HT8菌种到20mL液体种子培养基，37℃，160r／min培养18h；

步骤四、黄豆的处理：选取颗粒饱满，大小均匀的黄豆，称量洗净，与水以1：3的比例于30℃下浸泡3h，沥干，再称取一定量于小烧杯中，在高温高压灭菌锅下，121℃蒸煮30min，冷却，待用；

步骤五、接种：将HT8纳豆菌和毛霉按1：10的比例接种，其接种总量为黄豆总质量的4％，接种时可用移液枪进行操作；

步骤六、培养：在25℃的温度下培养，在22h时拌菌一次，待培养到48h，即得到豆豉前发酵产物；

步骤七、后熟：发酵成熟的豆豉加入一定比例的配料，拌匀，装罐，在4℃条件下，进行后熟处理48h，制得溶栓豆豉。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤一中LB培养基为：蛋白胨10g／L，酵母粉5g／L，氯化钠10g/L，磷酸二氢钾1g／L及余量的水。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤二中麸皮培养基为：麸皮10g，黄豆粉1g，水13.2g。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤七中黄豆与配料的配比为：每1000kg黄豆(干重)添加白酒50L，食盐180kg，花椒粉10kg，五香粉5kg。