[发明专利]一种高产率的葡萄藻培养方法

权利要求书

1.一种葡萄藻培养方法，其特征在于，该方法包括葡萄藻的异养或混养培养步骤和以异养或混养培养所获得的藻细胞作为种子实施的光自养培养步骤。

2.一种油脂和/或烃的生产方法，其特征在于，所述方法包括葡萄藻藻种的异养或混养培养步骤、以异养或混养所获得的藻细胞作为种子实施的光自养培养步骤、以及藻细胞采收及油脂和烃的提取步骤。

3.一种高效的葡萄藻培养方法或快速生产油脂和/或烃的方法，其特征在于，该方法包括：

（1）异养或混养培养葡萄藻，其中，培养过程，通过补料控制pH恒定以及碳、氮和/或磷等元素稳定在一定浓度范围内，异养或混养培养结束时控制碳、氮和/或磷等营养成分的浓度较低甚至为零；

（2）以异养或混养所得藻细胞作为种子实施光自养培养，以及

（3）采收藻细胞，和分离提取油脂和/或烃。

4.如权利要求1—3中任一项所述的方法，其特征在于，所用葡萄藻藻种包括但不限于Botryococcus braunii，Botryococcus sudeticus，Botryococcus sp.,Botryococcus spp.。

5.如权利要求1－3中任一项所述的方法，其特征在于，采用分批培养、补料分批培养、重复补料分批培养、半连续培养或连续培养等模式实施所述异养或混养培养。

6.如权利要求1－3中任一项所述的方法，其特征在于，所述异养或混养培养步骤包括：在生物反应器中加入pH为5.0～11.0的培养基，按工作体积的0.1～30%接入微藻藻种进行分批培养、补料分批培养、重复补料分批培养、半连续培养或连续培养，培养温度为10～40℃，控制pH小于10.0，控制溶氧在1％以上。

7.如权利要求1－4中任一项所述的方法，其特征在于，所述葡萄藻藻种异养培养时，不需要光照；所述葡萄藻藻种混养培养时，需要进行光照，光强范围1～2500μmolm^-2s^-1。

8.如权利要求1－3中任一项所述的方法，其特征在于，以异养或混养培养所获得的藻细胞作为种子进行光自养培养包括：将异养或混养培养的藻种接到光自养培养装置中进行光自养培养，培养温度为5～50℃，连续光照或间歇光照，光照强度为1～2500μmolm^-2s^-1，光自养培养周期为1～180天，初始接种密度为0.01～5.0克/升，所述培养基不含有机碳源，其pH为4.0～9.0。

9.如权利要求1－3中任一项所述的方法，其特征在于，藻种的异养或混养培养基含有氮源、有机碳源、植物生长激素、无机盐、微量元素和水，或由所述氮源、有机碳源、植物生长激素、无机盐、微量元素和水组成；所述光自养培养基含有植物生长激素、氮源、无机盐和水，或由植物生长激素、氮源、无机盐和水组成。

10.如权利要求1－3中任一项所述的方法，其特征在于，所述异养培养步骤在摇瓶、机械搅拌式、气升式或鼓泡式生物反应器中进行；所述混养步骤在摇瓶、可蒸汽灭菌的封闭式光生物反应器（透明），及机械搅拌式等含光照系统的生物反应器中进行；所述光自养培养步骤在摇瓶或选自敞开式的跑道池或圆池、封闭式的平板式光生物反应器或管道式光生物反应器或柱式光生物反应器或薄膜立袋或敞开式与封闭式杂交的光自养培养系统或贴壁培养系统等用于微藻光自养培养的任何装置中进行，光照条件为自然光或人工光。