[发明专利]基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法在审
| 申请号： | 201310686754.2 | 申请日： | 2013-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN104711227A | 公开（公告）日： | 2015-06-17 |
| 发明（设计）人： | 魏彦杰;张慧玲;彭丰斌;孟金涛;冯圣中 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12N5/077 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 沈祖锋;郝明琴 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 体外 培养 激活 notch 信号 通路 方法 | ||
1.一种基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）将乳腺癌细胞和稳定表达Notch-1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养；
（2）待步骤（1）中的两种细胞分别生长到80%的密度，用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch-1配体的间质细胞；
（3）在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞，按1:1-2:1将稳定表达Notch-1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中；共同培养0.5～48h，实现激活乳腺癌细胞中Notch-1信号通路。
2.根据权利要求1所述的基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的乳腺癌细胞为三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231。
3.根据权利要求1所述的基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的稳定表达Notch-1配体的间质细胞为表达Jaddeg-1的小鼠成纤维细胞LTK-JAG细胞。
4.根据权利要求1所述的基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于：步骤（2）中所述的PBS缓冲清洗并收集的步骤为将稳定表达Notch-1配体的成纤维细胞通过细胞收集刮收集至5ml PBS缓冲液中，离心1000×g，5分钟，弃上清。
5.根据权利要求1所述的基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的培养的温度为37℃。
6.根据权利要求1所述的基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的间质细胞为重悬步骤（2）中收集的稳定表达Notch-1配体的间质细胞。
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