[发明专利]一种果渣酶及其制备和应用

权利要求书

1.一种果渣酶，其特征在于，所述果渣酶按如下重量份数组成：纤维素酶10-15份、果胶酶5-10份、木聚糖酶3-8份、甘油10-15份、NaCl5-10份、水52-67份。

所述纤维素酶由黑曲霉（Aspergillus niger）Li-2013-03发酵制得，菌株编号CGMCC NO.7927。

2.如权利要求1所述的一种果渣酶，其特征在于，所述纤维素酶具体制备方法如下：

（1）黑曲霉菌种活化

（2）黑曲霉液体种子培养

将黑曲霉菌株接入500mL三角瓶中，种子培养基装量100毫升，30℃、150rpm摇床培养72-96h。

（3）黑曲霉发酵培养

将步骤(2)得到的黑曲霉种子液体种子以10%（v/v）接种量接入装有7.5L发酵液的10L发酵罐中，控制pH值恒定为6.0±0.2，培养温度30±0.1℃，搅拌速度300rpm，通风量（v/v）1:0.8-1.2,培养时间96h，溶解氧20-30%。

（4）发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得到纤维素酶。

3.如权利要求1或2所述的一种果渣酶，其特征在于，所述发酵培养基组成为：纤维素粉100g、硫酸铵5g、硫酸镁0.25g、磷酸二氢钾1g、氯化钠0.1g、自来水定容1000mL，pH值5-6，121℃灭菌20min。

4.如权利要求1所述的一种果渣酶，其特征在于，按如下重量份数组成：纤维素酶15份、果胶酶8份、木聚糖酶5份、甘油10份、NaCl10份、水52份。

5.如权利要求1所述的一种果渣酶，其特征在于，所述果渣酶在果渣酶解工业中的应用条件为：

（1）温度：最适温度40℃-50℃，有效温度20℃-60℃；

（2）pH值：最适pH值3.5-5.5，有效PH3.0—6.0；

（3）添加量：400-1000ml/t果渣；

（4）作用时间：2h-6h。

6.如权利要求1所述的一种果渣酶，其特征在于，所述果渣酶在果渣酶解工业中的应用条件为：45℃，pH值4条件下，每吨果渣添加800mL果渣酶，酶解4h。

7.一种果渣酶的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）按如下重量份数组成称取所述果渣酶中的各组分：纤维素酶10-15份、果胶酶5-10份、木聚糖酶3-8份、甘油10-15份、NaCl5-10份、水52-67份；

（2）于20-25℃条件下将甘油与水混合均匀后，将NaCl溶解于甘油-水溶液中；

（3）将预先称量好的纤维素酶、果胶酶及木聚糖酶置于混合机中搅拌，同时将甘油-NaCl-水溶液份3-5次加入混合机，搅拌时间为5-10分钟。

（4）搅拌均匀后于常温或冷室中保存。

所述果胶酶和木聚糖酶，源于宁夏夏盛实业集团有限公司产品。

所述纤维素酶制备方法如下：

①黑曲霉（Aspergillus niger）Li-2013-03活化;

②黑曲霉（Aspergillus niger）Li-2013-03液体种子培养

将黑曲霉菌株Li-2013-03接入500mL三角瓶中，种子培养基装量100毫升，30℃、150rpm摇床培养72-96h;

③发酵培养

将步骤②得到的黑曲霉种子液体种子以10%（v/v）接种量接入装有7.5L发酵液的10L发酵罐中，控制pH值恒定为6.0±0.2，培养温度30±0.1℃，搅拌速度300rpm，通风量（v/v）1:0.8-1.2,培养时间96h，溶解氧20-30%;

④发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得到纤维素酶。