[发明专利]一种具有灭螺活性的不动杆菌属细菌及其应用无效
申请号: | 201310686919.6 | 申请日: | 2013-12-13 |
公开(公告)号: | CN103695345A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 张玉琼;陈娜;孙启祥;张倩;叶爱华 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P9/00;C12R1/01 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 胡敏 |
地址: | 230001 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 活性 不动 杆菌 细菌 及其 应用 | ||
技术领域
本发明涉及的是一种微生物,具体地,本发明涉及的是一种具有灭螺活性的不动杆菌属细菌及其应用。
背景技术
钉螺是血吸虫的唯一中间寄主,是血吸虫病传播的关键媒介,因而杀灭钉螺是阻断血吸虫病传播的有效途径之一。目前我国所用的杀螺剂主要是化学药物类,这类药物选择性差,如世界卫生组织WHO推荐的杀螺剂氯硝柳胺,杀灭钉螺效果显著,但同时对水生动物等生物毒性很大,容易对环境造成不可逆破坏。因此,探索灭螺新方法、研究新的灭螺剂,特别是寻找生物灭螺方法及其试剂,以实现既有效灭杀钉螺,又减少对环境破坏,保护环境保护的目的,成为现今研究的重要方向。
迄今为止,国内外学者已筛选出一些有灭螺活性的微生物,如凸形假单胞菌、浅灰链霉菌、灰色直丝链霉菌和苏云金芽孢杆菌等,但尚有很多具有灭螺活性的菌株有待研究,如至今还没有不动杆菌属细菌具有灭螺活性的报道。本研究基于濒死钉螺体内可能含有灭螺活性相对较强的菌株,从中分离抑螺和杀螺菌株,研究其杀螺活性,筛选出高效灭螺、毒性低的新的菌株。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供了一种具有灭螺活性的不动杆菌属细菌及其应用,以提供一种高效、低毒的具有灭螺活性的不动杆菌属细菌菌株。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明的具有灭螺活性的不动杆菌属细菌,Acinetobacter sp.X2,已于2013年9月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC;地址:中国武汉,武汉大学;邮编:430072)保藏编号为CCTCC NO:M2013417。
本发明的不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417是从濒死的不含血吸虫的阴性钉螺中筛选获得的,其生物学特征如下:
(1)形态学特征:该细菌为革兰氏染色阴性菌,在光学显微镜16×100油镜下观察该细菌呈短圆杆状,多数呈单个分布。
(2)培养特征:在YEB固体培养基中生长良好,菌落近似圆形,边缘光滑,呈乳白色,易挑起,在YEB液体培养基中呈浑浊的浅黄色。
所述不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417的16SrRNA序列如SEQ ID NO.1所示,其中所述16srRNA序列有480个碱基,将序列输入GenBank数据库中进行BLAST比对处理,结果发现,该16srRNA序列与不动杆菌属细菌JB9(Acinetobacter sp.JB9)的16srRNA序列(GenBank登录号:EF103562.1)同源性为99%,结合形态学特征和培养特征鉴定该不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417确实属于不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。
本发明还提供了上述具有灭螺活性的不动杆菌属细菌在制备抗钉螺药物中的应用。
本发明相比现有技术具有以下优点:本发明提供了一种具有灭螺活性的不动杆菌属细菌及其应用,该不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417是从自然界中的濒死钉螺中筛选获得的,生长周期短,对环境要求低,能够用于制备抗钉螺药物快速有效地杀灭钉螺,同时,该不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417的灭螺活性高,毒性低,是一种新的具有灭螺活性的细菌,为抗钉螺药物的筛选提供了新的选择。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明,本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
不动杆菌属细菌CCTCC NO:M2013417菌株的筛选:
1、培养基的配制:
1)YEB液体培养基:牛肉浸膏为5.0g/L,酵母膏为1.0g/L,蛋白胨为5.0g/L,MgSO4·7H2O为4g/L,蔗糖为5.0g/L,pH7.0~7.5;
2)YEB固体培养基:将上述YEB液体培养基中加入15g/L的琼脂。
2、筛选步骤:
1)在无菌条件下,取8只濒死阴性钉螺,用体积分数为75%的酒精浸泡3分钟,无菌生理盐水冲洗3遍后,将钉螺捏碎并研磨,加入2mL的无菌生理盐水,获得组织浆液;
2)将步骤1)的组织浆液接种到100mL的YEB液体培养基中,37℃培养12~16小时,培养的转速为200rpm,获得培养液;
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