[发明专利]一种马鞭石斛的组织培育方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材的培育方法，尤其涉及一种马鞭石斛的组织培育方法。

背景技术

马鞭石斛为兰科石斛，是传统的名贵中药材。《神农本草经》中有记载，其具有益胃生津、滋阴生津、清热止咳润肺等功效。现代药理研究表明，石斛还有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。由于石斛的自然繁殖能力低，需要依附在树木、岩石或者苔藓上进行繁殖跟生存，由于生存能力低，生产周期长，加上人类的大量采掘，造成此种名贵中药材难以满足市场的药物需求。

发明内容

本发明为了满足市场上对中药材马鞭石斛的需要，提供了一种生产周期短，成活率高，产量高的马鞭石斛的组织培育方法，其中，包括以下步骤：

1)培育瓶的消毒：培养瓶先采用臭氧进行间断消毒后用无菌水在常温下浸泡20-30分钟，晾干后采用150-200℃热水进行高温喷淋灭菌，对培育瓶进行臭氧、无菌水以及高温反复消毒杀菌是为了保证培育瓶的干净无菌，不会携带任何对外植体培育有害的细菌，安全的无菌环境给马鞭石斛种苗的培育提供了一个良好的生长条件；

2)培养基的制备：在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.1-1.2mg／L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼，搅拌均匀，室内静置1-2小时，在基础的培养基的基础上添加一定比例的生长调节剂能够更好地促进马鞭石斛的快速生长，使其生长周期缩短，添加白糖是为了增加培养基中的碳源，增加了马鞭石斛的繁殖量，添加天然提取物马铃薯汁以及茶子饼一个是促进马鞭石斛外植体生根壮苗，使其根系繁茂，另一个茶子饼中含有茶皂素能够很好地防止根茎着受病虫害的侵蚀；

3)外植体的培养：选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3-4遍，放在用水稀释了3500-4000倍的链霉菌和好力克的溶液中浸泡3-5小时，浸泡是为了防止马鞭石斛根茎腐烂；

4)培育：将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为20-25℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为70-80％，光照时间为12-14小时，光照强度为1200-20001x。

优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤1)中的臭氧间断消毒是采用浓度为2-3ppm的臭氧在间隔15-20分钟消毒2-3次。

优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤2)中培养基的优选用量为NAA0.1-1.2mg／L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼的重量组分别为20-30、12-20和5-10。

优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤4)中外植体接种至培养基的培养时间为1-2月，间隔10天往培养瓶中添加步骤2)中同样比例配比的培养基，间隔20天往培养瓶中添加含有N、P、K、Mg、Zn、Na的复合营养液，间隔喷施营养液可以促进马鞭石斛生长速度快。

本发明提供的方法通过对培养瓶的重复消毒杀菌，培养基的养分调配以及添加链霉菌和好力克的溶液中浸泡马鞭石斛根茎，达到了根茎防腐防虫害的效果，营养成分高，缩短了马鞭石斛的生长周期，提高了马鞭石斛的存活率，增加了产量。

具体实施方式

下面结合具体的实施方法对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

实施例1

采用浓度为2ppm的臭氧间隔20分钟对培育瓶进行消毒，总共消毒2次后用无菌水在常温下浸泡20分钟，晾干后采用150℃热水进行高温喷淋灭菌；在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.1mg／L、6-BA1.0mg／L、白糖4克、马铃薯汁8克和茶子饼4克，搅拌均匀，室内静置1小时；选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3遍，放在用水稀释了3500倍的链霉菌和好力克的溶液中浸泡3小时，浸泡是为了防止马鞭石斛根茎腐烂；将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为20℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为80％，光照时间为12小时，光照强度为12001x，2-3个月培育出来的种苗已经适合移栽，移栽后的种苗6-7个月可以采收，成活率97％。

实施例2