[发明专利]一种用于糖丝菌的PCR引物及检测糖丝菌的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201310689164.5 | 申请日： | 2013-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN103614488A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 梅海;郝纯;李雪;张勇 | 申请（专利权）人： | 盎亿泰地质微生物技术（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 冯琼 |
| 地址： | 102200 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 糖丝菌 pcr 引物 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一对扩增糖丝菌DNA的PCR引物，其特征在于，其上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示。
2.一种检测糖丝菌的试剂盒，其特征在于，包含用于扩增的PCR引物，其上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示。
3.一种检测糖丝菌的方法，包含以下步骤：
步骤1：配制PCR反应体系，94℃预变性10分钟进行30个PCR循环，循环完毕后72℃延伸10分钟；所述PCR反应体系中上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示；
步骤2：检测扩增结果并进行测序比对。
4.根据权利要求3的方法，其特征在于，步骤1所述PCR循环参数为：94℃变性1min、56℃复性1min、72℃延伸1min。
5.根据权利要求3的方法，其特征在于，步骤1中所述PCR反应体系为：
PCR缓冲液:5μL
dNTP:4μL
Primer F上游引物:1μL
Primer R下游引物:1μL
样品DNA:1μL
Taq:0.5μL
ddH2O:37.5μL
其中，样品DNA浓度为10-200ng/μL，上游引物及下游引物浓度为10-20pmol/μL。
6.根据权利要求3的方法，其特征在于，步骤2所述检测为琼脂糖电泳检测280bp的条带出现。
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