[发明专利]中药苦黄注射液及其原料药材、半成品的指纹图谱检测方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的质检方法，具体涉及一种苦黄注射液及其原料药材、半成品的指纹图谱检测方法及应用。

背景技术

苦黄注射剂是经典中药注射剂，具有稳定和良好的临床疗效。处方源于《伤寒论》中的“茵陈蒿汤”（茵陈、大黄、山桅）。此方历来被公认为治疗湿热黄疸的名方。苦黄注射液在此方基础上，加减而得。该注射剂最早于96年批准上市销售，执行标准为国家药品标准（新药转正标准第30册），为常熟雷允上制药有限公司（前身国营常熟制药厂）开发的一种有效治疗黄疸型病毒性肝炎的中药注射剂（药品注册号为国药准字Z10960004），苦黄注射剂销售近20多年来，临床效果明显，为肝病患者带来了康复的机会。苦黄注射液由大黄、苦参、大青叶、春柴胡、茵陈等5味药材制成，由于药材较多，化学成分复杂，致使其质量控制难度较大。苦黄注射剂活性成分主要是黄酮类、蒽醌类及生物碱类化合物，但是目前苦黄注射剂活性成分的质量标准检测方法只能一个一个对活性成分进行单独检测，或者只能对某个部位进行单独检测，检测工作繁琐，检测效率低，且检测的活性成分数量有限，不能很好的反应制剂的质量。

因此，很有必要在现有技术的基础之上，设计研发一种能全面检测和评价苦黄注射液质量的指纹图谱检测方法。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种苦黄注射液及其原料、半成品的指纹图谱检测方法，该检测方法可以客观、全面、准确的评价苦黄注射剂的质量，对控制苦黄注射剂的质量和原料药材的质量和保证临床疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现以上技术目的，本发明采取的技术方案为：

中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

（1）供试品溶液制备：取苦黄注射液作为供试品溶液；

（2）高效液相色谱法测定苦黄注射液的对照指纹图谱：取10批以上苦黄注射液样品在适当的色谱条件下进样，测得各批次苦黄注射液的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用相似度软件计算获得共有模式作为对照指纹图谱；

（3）高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：将待测苦黄注射液供试品溶液按步骤（2）相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；

（4）将步骤（3）得到的供试品溶液指纹图谱和步骤（2）得到的对照指纹图谱用相似度软件评价。

以上所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，步骤(2)和步骤(3)所述的色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为1：100的HAc：H₂O为流动相A相，体积比为1：100的HAc：CH₃OH为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温35～40℃，检测波长为250～260nm。

以上所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，步骤(2)和步骤(3)所述的色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为0.5:100的Hac：H₂O为流动相A相，体积比为0.5:20:80的HAc:H₂O:CH₃CN为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温30～35℃，检测波长为260～270nm。

作为优选方案，以上所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，步骤（2）和步骤（3）所述的色谱条件为：以DianmonsilC18(5μm，4.6×250mm)为测定用色谱柱，体积比为1：100的HAc：H₂O为流动相A相，体积比为1：100的HAc：CH₃OH为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温40℃，检测波长为254nm。线性梯度洗脱方式为：0分钟时流动相A:B的比例为85:15，25分钟时流动相A:B的比例为33：67，65分钟时流动相A:B的比例为0：100。

作为优选方案，以上所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，步骤（2）和步骤（3）所述的色谱条件为：以DianmonsilC18(5μm，4.6×250mm)为测定用色谱柱，体积比为0.5:100的Hac：H₂O为流动相A相，体积比为0.5:20:80的HAc:H₂O:CH₃CN为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温30℃，检测波长为262nm。线性梯度洗脱方式为：0分钟时流动相A:B的比例为98:2，20分钟时流动相A:B的比例为84：16，30分钟时流动相A:B的比例为80：20，90分钟时流动相A:B的比例为40：60，100分钟时流动相A:B的比例为0：100。