[发明专利]一种具有抗氧化活性文蛤多糖的提取及应用方法

权利要求书

1.一种文蛤多糖的提取方法，其特征在于该方法以文蛤软体为原料匀浆，加酶辅助热水浸提、浓缩、乙醇沉淀得到文蛤多糖粗品，再经过sevage法脱去蛋白后，依次通过阴离子交换柱和凝胶过滤柱进行分离纯化，最终得到文蛤多糖精品，其纯度达到90%以上；具体步骤为：

①加酶辅助水浸提：将文蛤软体匀浆，加5倍质量的去离子水混合，加入胰蛋白酶，加酶量为底物质量的2%，50-55 ℃浸提4-5 h，离心分离取上清；

②浓缩、醇沉：将上清液浓缩至原来的1/10，加入3倍体积的无水乙醇，4 ℃静置过夜，离心收集沉淀物，用无水乙醇洗涤，挥干乙醇；

③Sevage法脱蛋白，冻干：将上述（2）中得到的多糖粗品用水复溶，按体积比1：1加入sevage试剂，振荡1 h，用分液漏斗静置去除上层有机试剂及中间固体，然后旋转蒸发去除残余有机试剂，冻干得文蛤多糖粗品；

④阴离子交换柱纯化：将文蛤多糖粗品溶于水，过0.22 μm滤膜，然后用DEAE-52纤维素柱对文蛤多糖粗品进行纯化，采用去离子水进行平衡，分别用0、0.1、0.3mol/L NaCl进行阶段洗脱，每个浓度溶液洗脱2-3个柱体积，流速2 mL/min，每个浓度各洗脱得到一个峰，收集D2组分；

⑤凝胶过滤柱纯化：将收集的D2组分浓缩，采用Superdex 200凝胶过滤柱进行进一步纯化，用去离子水2.5倍柱体积进行洗脱，流速为0.3 mL/min，得到两个多糖峰D21和D22组分，为文蛤多糖纯品；

⑥冷冻干燥：将D21和D22组分进行冷冻干燥，制备文蛤多糖精品，D21组分呈白色疏松絮状，D22组分呈白色粉末状。

2.根据权利要求1所述的方法取得的文蛤多糖精品在保健品方面的应用方法，其特征为：添加文蛤多糖精品D21、D22中的一种或两种至终浓度为1-10mg/ml，配以蜂蜜、柠檬酸中的一种或两种作为辅料，即可得具有抗氧化作用的文蛤多糖口服液。