[发明专利]转基因油菜籽MS8品系的LAMP检测试剂及检测方法有效

专利信息
申请号: 201310694723.1 申请日: 2013-12-17
公开(公告)号: CN103695544A 公开(公告)日: 2014-04-02
发明(设计)人: 黄素文;张吉红;王建峰;倪健波;李如松 申请(专利权)人: 宁波检验检疫科学技术研究院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 代理人: 程晓明
地址: 315012 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 转基因 油菜籽 ms8 品系 lamp 检测 试剂 方法
【权利要求书】:

1.转基因油菜籽MS8品系的LAMP检测试剂,包括2×LAMP反应缓冲液、Bst DNA聚合酶和特异性引物,其特征在于所述特异性引物的核苷酸序列分别为:

F3:TCGAATCATA TTCGTACTGT AGT

B3:AAAACCTCTC TTTGTAGAAA CA

FIP:GCCACTCGAA GGACAAATTT TAAAATTTTT ATGATCAAAG CGTCCTCA

BIP:AAGTGTCAAA CTCTCATCCA AACATTTTAT GCCATTTAGT TAACTAGTTG A

LF:TGCTGTGGCC CATAAACCT。

2.利用权利要求1所述的转基因油菜籽MS8品系的LAMP检测试剂检测转基因油菜籽MS8品系的方法,其特征在于步骤如下:

A、DNA提取:油菜籽样品粉末用DNA提取试剂盒提取,得到DNA模板,具体依DNA提取试剂盒说明书进行;

B、LAMP检测:25μL反应体系为2×LAMP反应缓冲液12.5μL,浓度为8U/μLBst DNA聚合酶1.5μL,浓度都为20μmol/L的引物F3和B3各为0.2μL,浓度为20μmol/L的引物LF为0.8μL,浓度都为20μmol/L的引物BIP和FIP各为1.6μL,DNA模板2.0μL,余量为双蒸水;LAMP反应条件为反应管在61℃恒温水浴锅中扩增1h,扩增结束后,8000r/min室温离心1min,染色剂SYBR Green I与扩增产物充分混合,反应管内颜色若变为绿色,则为转基因油菜籽MS8品系。

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