[发明专利]一种提高水稻磷吸收率的方法有效
申请号: | 201310696522.5 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103710356A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 苏军;张武君;宋亚娜;付艳萍;颜静宛;胡太蛟;李刚;林智敏 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/84;C12N15/66 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350003 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 水稻 吸收率 方法 | ||
1.一种提高水稻磷吸收率的方法,其特征在于:通过在水稻中过量表达编码蔗糖转运蛋白基因OsSUT2实现。
2.根据权利要求1所述的一种提高水稻磷吸收率的方法,其特征在于:所述过量表达OsSUT2基因,基因编号为AB091672,基因的cDNA全长1505bp,编码501个氨基酸,基因序列如SQE ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的一种提高水稻磷吸收率的方法,其特征在于:所述过量表达是利用PCR方法同源克隆出水稻OsSUT2基因,采用F-primer:SQE ID NO:2和R-primer:SQE ID NO:3扩增出OsSUT2基因cDNA;构建过量表达植物载体p1300UbiOsSUT2;借助农杆菌介导法获得转OsSUT2基因水稻;通过自交分离筛选获得过量表达OsSUT2基因的纯合株系。
4.根据权利要求3所述的一种提高水稻磷吸收率的方法,其特征在于:所述植物表达载体p1300UbiOsSUT2是将中间载体pUbiOsSUT2酶切回收并与p1300连接获得的;将连接在T-easy测序载体上的水稻蔗糖转运蛋白OsSUT2 cDNA经EcoRI酶切重组到质粒pBluescriptIIKS,得到中间载体pBlueOsSUT2,然后用BamHI/KpnI双酶切中间载体,将pBlueOsSUT2中的OsSUT2正向连接到终止子T-nos的前面,得到中间载体pUbiOsSUT2;将pUbiOsSUT2酶切回收UbiOsSUT2片段连接在质粒P1300上,获得转化载体P1300UbiOsSUT2。
5.根据权利要求4所述的一种提高水稻磷吸收率的方法,其特征在于:转化包括以下步骤:
1)胚性愈伤的诱导;
2)胚性愈伤的遗传转化;
3)抗性愈伤的筛选;
4)抗性植株的分化、生根培养。
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