[发明专利]一种含有栖热菌的活性填料的制备方法

权利要求书

1.一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 

(1)斜面培养：培养制备栖热菌斜面菌种 

(2)菌悬液的制备：将制备的栖热菌斜面按5-20%接种量逐级扩大发酵培养至发酵罐，培养温度60℃，培养时间48h，通风量5-200L/min，溶解氧30%,罐压0.03-0.10Mpa,发酵液置于冷冻离心机中于4℃，2000-8000rpm，离心浓缩5-20min，弃去上清液，沉淀分别用无菌营养液稀释，获得菌体浓度为0.4-0.8g/L栖热菌菌悬液； 

(3)微生物活性填料的制备： 

(a)将步骤(2)制备的微生物菌悬液喷淋到多孔材料的表面； 

(b)将带有栖热菌菌细胞的耐腐蚀耐高温多孔材料块放入旋转混合器中旋转混合； 

(c)再次向耐腐蚀耐高温多孔材料表面喷淋微生物菌悬液，获得微生物活性填料，4℃保存备用； 

所述栖热菌为水管致黑栖热菌(Thermus Scotoductus)ZDL1，保藏编号CGMCC No.7430。 

2.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述的栖热菌斜面培养基组成为：牛肉粉3.0-5.0g，Na₂S₂O₃·5H₂O5.0g，KH₂PO₄2.0g，KNO₃2.0g，NH₄Cl0.5g，MgCl₂·6H₂O0.5g，FeSO₄·4H₂O0.01g，NaHCO₃1.0g,水1000ml，琼脂15g，pH值6.0-7.5，121℃灭菌30min。 

3.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述的栖热菌液体发酵培养基的组成为：牛肉粉3.0-5.0g，Na₂S₂O₃·5H₂O5.0g，KH₂PO₄2.0g，KNO₃2.0g，NH₄Cl0.5g，MgCl₂·6H₂O0.5g，FeSO₄·4H₂O0.01g，NaHCO₃1.0g,水1000ml，pH值6.0-7.5，121℃灭菌30min。 

4.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述的无菌营养液的组成为：牛肉粉3.0-5.0g，KH₂PO₄2.0g，KNO₃2.0g，NH₄Cl0.5g，MgCl₂·6H₂O0.5g，FeCl₂·7H₂O0.01g，NaHCO₃1.0g,水1000ml，pH值6.0-7.5，121℃灭菌30min。 

5.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述的多孔材料为陶粒、颗粒活性炭、火山岩、海绵中的至少一种。 

6.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述多孔材料密度为0.7-1.0kg/m³，孔隙率为50-96%，粒径为5-50mm。 

7.如权利要求1所述的一种含有栖热菌的活性填料的制备方法，其特征在于：所述水管致黑栖热菌ZDL1菌悬液与多孔材料的质量比为50-300∶10。