[发明专利]一种非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种基因工程及肿瘤学领域，具体是一种非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物及其应用。

背景技术

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，全球范围内肺癌死亡率都属恶性肿瘤之首。肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明确，大量资料表明，长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系。已有的研究证明：长期大量吸烟者患肺癌的概率是不吸烟者的10～20倍，开始吸烟的年龄越小，患肺癌的几率越高。此外，吸烟不仅直接影响本人的身体健康，还对周围人群的健康产生不良影响，导致被动吸烟者肺癌患病率明显增加。城市居民肺癌的发病率比农村高，这可能与城市大气污染和烟尘中含有致癌物质有关。因此应该提倡不吸烟，并加强城市环境卫生工作。

从临床特征的角度看，目前国际上倾向于将肺癌分为小细胞肺癌Small cell lung cancer(SCLC)和非小细胞肺癌Non small cell lung cancer(NSCLC)。非小细胞肺癌占肺癌的85％以上，而非小细胞肺癌中85％以上又都属中晚期肺癌而失去根治性手术治疗的机会。在我国肺癌病死率升高的主要原因是由于目前肺癌早期缺乏有效的筛选和诊断，所以80％的肺癌患者在确诊已经是晚期，失去了最佳的治疗时间。因此对非小细胞肺癌的诊断，尤其是早期诊断显得尤其重要。

microRNA是一类约22nt的小分子RNA，调控基因表达。目前有研究显示，microRNA能以沉默复合体的形式稳定存在于人类的血清/血浆中。癌症患者由于细胞破损，会释放一部分癌症特异的microRNA进入循环系统中，这部分microRNA就能作为生物标志物进行肿瘤的早期诊断。

发明内容

本发明的目的在于提供一种非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物及其应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物，该miRNA标志物为SEQ-1 miR-328、SEQ-2 miR-339、SEQ-3 miR-1254、SEQ-4 miR-574-5p、SEQ-5 miR-21、SEQ-6 miR-200c中的任意一种或多种组合。

所述的非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物在制备诊断试剂盒或治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

所述的非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物的引物，该引物包括SEQ-1 miR-328的正向引物和逆向引物、SEQ-2 miR-339的正向引物和逆向引物、SEQ-3 miR-1254的正向引物和逆向引物、SEQ-4 miR-574-5p的正向引物和逆向引物、SEQ-5 miR-21的正向引物和逆向引物、SEQ-6 miR-200c的正向引物和逆向引物。

所述的任意一对或多对非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物的引物在制备诊断试剂盒或治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

一种非小细胞肺癌预后辅助诊断试剂盒，该试剂盒含有血清/血浆miRNA中SEQ-1 miR-328、SEQ-2 miR-339、SEQ-3 miR-1254、SEQ-4 miR-574-5p、SEQ-5 miR-21、SEQ-6 miR-200c中的任意一种或多种miRNA的引物。

所述的非小细胞肺癌预后辅助诊断试剂盒，该试剂盒含有任意一对或多对权利要求3所述非小细胞肺癌早期诊断血清/血浆miRNA标志物的引物。

所述的非小细胞肺癌预后辅助诊断试剂盒，该试剂盒还包括PCR技术常用的试剂，所述PCR技术常用的试剂包括逆转录酶、缓冲液、dNTPs、MgCl₂、DEPC水和Taq酶。

所述的非小细胞肺癌预后辅助诊断试剂盒，该试剂盒还包括标准品和/或对照品。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明阐明和提供了的血清/血浆微小核糖核酸(microRNAs/miRNAs)标志物作为非小细胞肺癌预后辅助判断和治疗决策的标志物的优越性在于：