[发明专利]一种桑蚕虫草工厂化生产方法

说明书

技术领域

本发明与冬虫夏草室内人工栽培有关，是一种利用桑蚕幼虫体在室内生产出冬虫夏草菌的桑蚕虫草工厂化生产工艺。该工艺生产出的产品是虫体(桑蚕幼虫形)和草体(子实体)的接合体，与自然生长的冬虫夏草形体相似、主要成分及药用价值基本相同。

背景技术

公开号为CN103262751A的中国专利公开了一种利用蛹虫草菌种感染家蚕幼虫培育蚕虫草的方法，其包括如下步骤：(1)家蚕的选择：选择五龄第3～5d的家蚕作为寄主；(2)菌种制备：将蛹虫草菌种接种于液体培养基中，震荡培养后，无菌纱布过滤除菌球后得液体菌种；(3)营养土的制备：配制含水量5％～20％的土壤，高温高压灭菌后作为营养土；(4)接种：将家蚕放入紫外下灭菌20～50min，然后注射0.2～0.4ml的液体菌种到家蚕体内；(5)培养管理：将接种后的家蚕放入营养土内，放置在5℃～12℃环境下避光培养5～12d，后转入光强为50～200lx，温度为21℃～23℃，湿度为86％～89％的条件下培养35～60d，即得蚕虫草。该方法的不足之处在于，1)将家蚕放入紫外下灭菌20～50min的家蚕前处理时间太长；2)没有条件的用0.2～0.4ml的液体菌种注射到家蚕体内，将使家蚕体流出体液；3)将接种后的家蚕放入营养土内，放置在5℃～12℃环境下避光培养，将使家蚕体流出更多体液而只剩下蚕体的皮。该专利难以得到蚕虫草。

公开号为CN1304995的中国专利公开了一种用家蚕培育生产冬虫夏草的方法(申请号01103275.8，发明人时连根等)，该发明公开的是用家蚕(B ombyx mori L.)培育生产冬虫夏草的方法。其是在对冬虫夏草菌作理化生物学处理后，接种于家蚕体，再模拟天然环境，使冬虫夏草菌侵染寄生家蚕体并最后长出子座，培育出冬虫夏草菌。该专利不足之处在于，对冬虫夏草菌作理化生物学处理后，接种于家蚕体的菌种难以在家蚕体内生长，成功率极低，形不成批量生产。

上述专利的不足之处在于，没有真正调查到冬虫夏草菌的生长关键点而没有采取相应措施，所以不能批量生产出冬虫夏草菌。

发明内容

本发明的目的是利用桑蚕幼虫体在工厂内人工生产出与自然冬虫夏草形体相似、药用价值基本相同的桑蚕虫草工厂化生产工艺。

为了达到上述目的，本发明提供了一种桑蚕虫草工厂化生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

第一步：对生产场所进行消毒；将活体桑蚕消毒后冲洗、晾干、备用；配制PDA培养基和米饭培养基；

第二步：分离蛹虫草的子实体，将子实体消毒、冲洗后，切碎，搁置到斜面培养基上，放到培养箱中进行培养15-25天；

第三步：将PDA培养基置于摇瓶中，将白色菌丝体放进摇瓶中震荡培养，4-8天后，将白色菌丝体接种于米饭培养基上，待长满白色菌丝体后，取出菌丝体加葡萄糖液，将菌丝捣碎，得到营养菌悬浮液作为接种液；

第四步：用吸有接种液的医用注射器刺注桑蚕幼虫体的腹足部，得到接种好的桑蚕幼虫体，将桑蚕幼虫体斜放在灭菌好的米饭培养基上，先将其进行避光变温培养，待洁白菌丝长满虫体，进行见光培养，待白色菌丝变黄，继续进行见光培养，待子实体长至5～8公分，子实体表面有黄色粉状物出现前即为成熟；

第五步：采收，排放在盘中凉干或晒干，将在50～55℃温度中进行烘干，使虫体水份含量不高于10％，以防止发霉变质；用薄膜袋密封，包装保存，或放置于干燥密封的容器中，严实盖好。

优选地，所述第四步中，待白色菌丝变黄，将砂土覆盖在桑蚕幼虫体上，只露出虫的头嘴，继续进行见光培养，第五步中，采收时，沿着子实体，用镊子扒开砂土，取出虫体和子实体，用清水洗去虫草上的砂土。

优选地，所述第一步中，将活体桑蚕消毒后冲洗、晾干、备用的具体步骤为：选取第5次蜕皮后4±2天的活体桑蚕，在无菌环境下，用75％乙醇溶液擦抹虫体，进行消毒，用无菌水冲洗消毒过的虫体，在无菌环境下晾干虫体，晾干的桑蚕幼虫体在-2℃±1℃低温保存备用。

优选地，所述第一步中的PDA培养基由无菌蒸馏水、去皮马铃薯、葡萄糖和琼脂混合得到，所述的无菌蒸馏水、去皮马铃薯、葡萄糖和琼脂的比例为1000mL∶150-250g∶10-30g∶10-30g。

优选地，所述的第一步中的米饭培养基由大米和水混合灭菌得到，所述的大米和水的比例为30-40克∶50ml。