[发明专利]杨树耐盐基因PtoeIF5A1的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种杨树耐盐基因PtoeIF5A1的应用。

背景技术

eIF5A是在真核生物中广泛存在的一类蛋白质，研究表明，eIF5A是唯一含有羧腐胺赖氨酸（hypusine）残基的蛋白质。进化分析显示，eIF5A在各物种间高度保守。实验表明，eIF5A参与了细胞的多项生理活动，如细胞增殖、蛋白质翻译、细胞衰老与凋亡等。在酵母体内，当eIF5A功能受到抑制或缺失时，部分蛋白合成减少。eIF5A的活性受到抑制时，细胞的生长延缓或停滞。

植物中eIF5A确切的生物学功能还不明确。Thompson等研究发现拟南芥中存在3个表达特征不同的eIF5A编码基因，AteIF5A1，AteIF5A2和AteIF5A3。Western Blotting分析表明，AteIF5A1只在衰老组织中表达，AteIF5A2在受机械损伤的组织中高水平表达，而AteIF5A3在细胞分裂很活跃的吸胀的种子中高水平表达。

发明内容

本发明的目的是提供一种杨树耐盐基因PtoeIF5A1的应用。

本发明提供了如下任一物质在提高植物耐盐性中的应用：

（1）SEQ ID No.2所示的蛋白质；

（2）SEQ ID No.2所示蛋白质的编码基因；

（3）含有（2）的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

上述应用中，所述SEQ ID No.2所示蛋白质的编码基因如SEQ ID No.1所示。

上述任一所述的应用中，所述耐盐性为耐NaCl的性质。

上述任一所述的应用中，所述提高植物耐盐性是指所述植物在含NaCl条件下的生长状态好；和/或，在含NaCl条件下的种子萌发率高；

所述生长状态好是指所述植物的叶片较大、颜色较绿；

上述任一所述的应用中，所述植物为拟南芥。

一种制备耐盐性提高的转基因植物的方法也属于本发明的保护范围，包括如下步骤：将SEQ ID No.2所示蛋白质的编码基因导入出发植物中，得到转基因植物；与出发植物相比，转基因植物的耐盐性增强。

上述方法中，所述编码基因是通过重组表达载体导入的，所述重组表达载体是将所述编码基因插入出发载体pBI121的多克隆位点得到的。

上述任一所述的方法中，所述转基因植物的耐盐性增强是指所述转基因植物在含NaCl条件下的生长状态好于出发植物在含NaCl条件下的生长状态；和/或，转基因植物的种子在含NaCl条件下的萌发率高于出发植物在含NaCl条件下的萌发率。

所述NaCl的浓度为150mM-175mM。

上述任一所述的方法中，所述植物为拟南芥。

上述任一所述的方法中，所述耐盐性为耐NaCl的性质。

本发明证明了PtoeIF5A1基因有耐受高盐的能力，该基因在使用基因工程手段提高林木或者作物耐盐方面具有应用价值。

附图说明

图1为Western-Blotting检测PtoeIF5A1蛋白在转基因拟南芥T0代植株以及对照拟南芥T0代植株中的表达。

图2为实时荧光定量PCR检测PtoeIF5A1基因的表达。

图3为T2代纯合转PtoeIF5A1基因的拟南芥以及T2代纯合转空载体pBI121拟南芥的耐盐性检测以及PtoeIF5A1蛋白的Western-Blotting检测。

图4为种子萌发实验。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

塔形毛白杨CV-BJHR01（Populus tomentosa Carr.cv‘BJHR01’）在文献“张利姣,张杰伟,陈亚娟,等.毛白杨真核细胞翻译起始因子5A基因(PtoeIF5A4)的克隆与表达分析[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2013,21(8):949-956.”中公开过，公众可从北京市农林科学院获得。