[发明专利]狭颅田鼠DNA序列无效

专利信息
申请号: 201310701606.3 申请日: 2013-12-18
公开(公告)号: CN103695546A 公开(公告)日: 2014-04-02
发明(设计)人: 张晓龙;姚李四;慈颖;乔舜;王海玲;房健慧;田丽;魏怀波 申请(专利权)人: 中国检验检疫科学研究院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/12;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100121 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 田鼠 dna 序列
【权利要求书】:

1.一种用于检测狭颅田鼠的DNA标准基因,其特征在于该基因为COI基因,具有如SEQ ID NO:1所示的基因序列。

2.一种检测权利要求1所述基因的引物,其特征在于该引物序列为:

正向引物5’ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA3’;

反向引物5’CCTACTCRGCCATTTTACCTATG3’。

3.一种用于检测狭颅田鼠的试剂盒,其特征在于包括权利要求2所述的引物。

4.狭颅田鼠的分子鉴定方法,包括:

1)从待测的鼠类肝脏中分离提取DNA;

2)以该DNA为模板,采用权利要求2所述引物进行扩增;

3)鉴定扩增所得序列,如果该序列与SEQ ID NO:1的同源性在98%以上,即可判断所测田鼠为狭颅田鼠。

5.权利要求4所述的分子鉴定方法,其中步骤2)中:

采用聚合酶链式反应扩增模板。

6.权利要求4或5所述的分子鉴定方法,其中步骤3)中:

所述鉴定包括取适量步骤2)扩增出的产物用琼脂糖电泳分离,经染色剂Goldview染色后于凝胶成像系统检测,根据扩增产物的大小判定结果,如果能特异性扩增出720bp左右的条带,则进行测序分析。

7.权利要求4或5所述的分子鉴定方法,其中扩增体系为:

8.权利要求4或5所述的分子鉴定方法,其中扩增反应程序为:

预变性94℃5min,35个循环,其中变性94℃30s、退火55℃40s、延伸72℃60s,最后延伸72℃10min。

9.权利要求6所述的分子鉴定方法,其中:

取5μL PCR扩增产物,用1%琼脂糖凝胶电泳,130V电压,电泳35min,染色剂Goldview染色,凝胶成像系统检测。

10.一种快速鉴定狭颅田鼠的方法,其特征在于:

采用传统的形态学鉴定与权利要求4-9任一项所述的分子鉴定方法相结合。

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