[发明专利]肌酐测定试剂

说明书

技术领域

本发明涉及医学临床化验技术领域，特别涉及肌酐测定方法和肌酐测定试剂。

背景技术

肌酐是一种低分子含氮化合物，分子量116000，主要由肌肉代谢产生。在肌肉中，肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓地形成肌酐，再释放到血液中，随尿排泄。在正常情况下，人体的肌酐含量基本保持稳定。血浆肌酐的正常上限值为100微摩尔/升左右。肌酐是小分子物质，可通过肾小球滤过，所以血清肌酐的浓度变化主要由肾小球的滤过能力来决定。滤过能力下降，则肌酐浓度升高。血肌酐值高出正常值多数意味肾脏受损，尿肌酐的含量高则可以反映肾过滤功能受损，因此肌酐的化验值能较准确的反应肾功能的情况。

目前医学临床测定血浆和尿肌酐主要采用酶催化法和化学测定法。其中酶催化法主要包括肌酸脒基水解酶和肌酐亚氨基水解酶水解进行测量肌酐的两种方法。

肌酸脒基水解酶测量肌酐的方法包括两步反应，具体详细步骤如下：

第一步：

第二步：

该方法采用双试剂法去除肌酸，第一步和第二步中的肌酸先后会呈色，因此第一步产生的醌亚胺为空白节点，以第二步产生的醌亚胺为标准计算带测定的标样中的肌酐的量。该方法显色灵敏度高、线性反应宽、试剂稳定性好的特点，但受维生素C、溶血和胆红素的干扰而影响结果。

肌酐亚氨基水解酶测量肌酐的方法步骤如下：

采用该方法在340nm测定谷氨酸吸光度的下降速率，便可以计算肌酐的含量。该方法使用时胆红素、乳糜、维生素C、溶血以及常用药物均不干扰此法对肌酐的测定。但试剂不够稳定、而且所用肌酐亚胺水解酶价格高。

发明内容

本发明的主要目的弥补现有两种常用肌酐化验方法的缺陷，提供一种通过监测340nm变化，既能避免维生素C、溶血和胆红素的干扰，同时试剂稳定性好、价格低的血浆中肌酐测定试剂。

本发明提出了一种肌酐测定试剂，包括试剂1和试剂2；其中，

所述试剂1包括：

所述试剂2包括：

优选地，所述防腐剂为ProClin系列防腐剂。

优选地，所述防腐剂为ProClin300。

优选地，所述表面活性剂和稳定剂为海藻糖。

优选地，所述试剂1包括：

N-三（羟甲基）甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液（PH7.4）25mmol/L；

所述试剂2包括：

N-三（羟甲基）甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液（PH7.6）100mmol/L；

优选地，所述试剂1包括：

N-三（羟甲基）甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液（PH7.4）25mmol/L；

所述试剂2包括：

N-三（羟甲基）甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液（PH7.6）100mmol/L；

采用本发明的肌酐测定试剂，采用了甲醛脱氢酶-NADH，消除了肌酸脒基水解酶测量肌酐方法受维生素C、溶血和胆红素的干扰的缺点；且消除了肌酐亚氨基水解酶测量肌酐方法中试剂成分不稳定的问题；并且测试结果稳定准确。

具体实施方式

应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明提出一种肌酐测定试剂，该肌酐测定试剂包括试剂1和试剂2；

其中试剂1的各组成和浓度范围为：

试剂2的各组成和浓度范围为：

采用本发明的上述肌酐测定试剂进行血样标本中肌酐含量测定的原理主要包括由上述肌酐测定试剂中试剂1和试剂2的“肌酸脒基水解酶、肌酐水解酶、肌氨酸氧化酶、甲醛脱氢酶”这四种酶催化的第一步反应和第二步反应。

其中，第一步反应原理为：

第二步反应原理为：