[发明专利]丹酚酸A在制备治疗肿瘤多药耐药性药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及丹酚酸A在抗肿瘤方面的应用，尤其涉及丹酚酸A在制备治疗肿瘤多药耐药性药物中的应用。

背景技术

中国人民共和国卫生部对全国第三次死因回顾抽样调查结果表明，恶性肿瘤是我国居民的第2大死亡原因。肿瘤的发生是一个复杂、长期的过程，受到体内、外多因素的影响，细胞通过增值、分化、不典型增生、转化以及间变等过程而形成恶性细胞。在各种肿瘤的化疗中，肿瘤多药耐药是影响化疗效果的一个重要因素，并可导致复发与转移，成为肿瘤治疗的最大障碍，已成为肿瘤化学治疗失败的一个主要原因。

肿瘤多药耐药性是指对一种抗肿瘤药物出现耐药的同时，对其他许多结构各异、作用机制不同的抗肿瘤药物也产生交叉耐药的现象。肿瘤多药耐药的作用机制十分复杂，主要包括以下几个方面：（1）通过降低药物摄入和增加药物外流从而导致细胞内药物浓度降低。（2）通过细胞内药物的代谢，激活或灭活药物。（3）通过改变细胞内耐药靶酶的水平或细胞内酶与药物的亲和力，使药物失效。（4）加强DNA损伤修复功能。(5)增强细胞抗凋亡调节能力等。其中研究最多的是多药耐药基因1(multidrug resistance1，mdr1)及其编码的耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)，P-gp的主要任务是将细胞内的药物泵出细胞外，从而减少药物对细胞的损伤，因此P-gp蛋白是引起肿瘤细胞多药耐药的重要原因。针对多药耐药机制，有许多的耐药逆转剂不断地被发现，但其毒副作用大等原因导致其无法广泛应用于临床。因此必须寻求有效的克服多药耐药性的药物。

活性氧(reactive oxygen species,ROS)属于氧自由基，是氧在机体还原过程中产生的中间产物及其衍生物，参与细胞增殖、分化、转化和凋亡以及细胞内重要信号途径的传导。ROS水平对肿瘤、糖尿病、神经退行性病变等氧化应激相关疾病的发生和进程具有复杂的影响。有研究报道细胞内ROS水平增高，能降低细胞内多药耐药蛋白P-gp的水平。通过干预ROS是减少多药耐药蛋白表达，促进耐药肿瘤细胞凋亡的有效方法。

丹酚酸A是从中药丹参中提取的一种水溶性有效单体成分，英文名称:Salvianolicacid A，分子量494.45，分子式：C₂₆H₂₂O₁₀，其化学结构式如下丹酚酸A通式。

丹酚酸A是一种具有广泛药理作用的水溶性成分，目前研究最多的是丹酚酸A在心血管保护、抗肝纤维化方面的作用。近期研究又发现丹酚酸A具有抗肿瘤活性，能够抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供丹酚酸A的新用途。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

丹酚酸A在制备治疗肿瘤多药耐药性药物中的应用。

发明人所研究的丹酚酸A比许多抗肿瘤的丹参有效单体(如丹参酮及其衍生物)具有更好的水溶性，因此具有更好的生物利用度。本发明公开了丹酚酸A对耐药肿瘤细胞具有较强的杀伤效果，机制为丹酚酸A可以通过增加耐药肿瘤细胞的活性氧水平，诱导耐药肿瘤细胞凋亡，并减少多药耐药蛋白P-gp的表达，从而克服多药耐药的肿瘤细胞。

有益效果：本发明公开了丹酚酸A在制备治疗肿瘤多药耐药性药物中的应用。丹酚酸A具有较丹参酮类的丹参提取物水溶性好的优点，具有更好的生物利用度。丹酚酸A对耐药肿瘤细胞具有比较亲本肿瘤细胞更加显著的抑制作用，其机制为通过增加活性氧表达水平，上调促凋亡蛋白表达，下调抑制凋亡蛋白表达，诱导耐药肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤耐药蛋白P-gp表达，从而克服肿瘤多药耐药细胞。因此，丹酚酸A具有制备克服肿瘤多药耐药的药物的应用前景。

附图说明

图1细胞毒性MTT实验显示丹酚酸A对乳腺癌细胞MCF-7及其多药耐药细胞MCF-7/MDR的生存率有剂量依赖性的抑制作用，对多药耐药细胞MCF-7/MDR的抑制作用更加明显。

图2流式细胞仪检测Annexin V/PI双染凋亡细胞实验显示丹酚酸A能诱导耐药肿瘤细胞MCF-7/MDR凋亡，并具有剂量依赖性（图中A-F丹酚酸A浓度为0,20,40,60,80,100μM)。

图3DCFH-DA法检测细胞活性氧ROS水平，A图表明耐药肿瘤细胞株具有比亲本肿瘤细胞株更高的ROS水平，B图显示丹酚酸A能上调耐药肿瘤细胞株活性氧ROS的水平，并具有剂量依赖性。