[发明专利]一种剑麻皂素的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及剑麻皂素，尤其涉及一种剑麻皂素的提取方法。

背景技术

剑麻皂素（tigogenin）具有抗炎、镇痛、增强免疫、降低血糖、抗肿瘤、抗癌、抗菌、降血脂、降血压等作用，应用广泛，可用于合成120多种激素类药物，还可应用于食品、化妆品及畜牧业等行业。剑麻皂素在剑麻中以甾体皂苷配基的形式存在，在其C3位和C26位等通过糖苷键与糖链（由葡萄糖、木糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等组成）相连，形成剑麻皂苷。生产剑麻皂素的关键工序是水解剑麻皂苷中与其直接相连的糖苷键。目前，国内生产剑麻皂素的工艺都是强酸水解法，用强酸来水解剑麻皂苷，其反应条件剧烈，设备要求高，污染严重，而且常伴有脱水、构型改变等副反应发生，影响产品质量。

发明内容

为了解决上述强酸水解法生产剑麻皂素技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种剑麻皂素的提取方法，先用剑麻皂苷水解酶降解剑麻皂苷，然后再从含有剑麻皂素的水解液提取剑麻皂素的方法。

本发明的目的通过如下技术方案实现：

1、一种剑麻皂素的提取方法，包括以下步骤：

(1)发酵产酶：将丝状真菌接种至培养基上，发酵结束后，将发酵液过滤，得到剑麻皂苷水解酶粗酶液；

(2)降解剑麻皂苷：将剑麻皂苷加入剑麻皂苷水解酶粗酶液，调节pH，搅拌反应后静置24～48小时，使剑麻皂素自然沉淀；

(3)离心收集剑麻皂素：将步骤(2)酶促反应液的上清液排出，5000～8000转/分钟离心分离沉淀液，收集沉淀，烘干、粉碎后得到剑麻皂素粗品；

(4)剑麻皂素的纯化：往剑麻皂素粗品中加入氯仿或正丁醇，过滤，浓缩滤液，冷却、结晶、离心收集沉淀；

(5)烘干沉淀：将步骤(4)离心收集的剑麻皂素沉淀烘干，得到剑麻皂素。

优选的是：步骤(1)所述的丝状真菌包括黑曲霉、链孢霉菌、青霉；所述的培养基为：每100ml水含有0.5～2g可溶性淀粉、0.1～2g胰蛋白胨、0.1～1gK₂HPO₄、0.01～0.8g MgSO₄、0.001～0.20g KCl、0.001～0.018g FeSO₄、0.5～3g剑麻渣粉末，培养基pH为7.0，接种量0.5～2％，发酵温度为30℃，发酵时间为42～54小时。

优选的是：步骤(2)中按1︰50～1︰100质量体积比将剑麻皂苷加入粗酶液。

优选的是：步骤(2)中调节pH4～6，搅拌反应温度为38～45℃，搅拌反应时间为15～22小时。

优选的是：步骤(4)中剑麻皂素粗品和氯仿按1︰8质量体积比加入，剑麻皂素粗品和正丁醇按1︰10质量体积比加入；浓缩滤液为原体积的10％，冷却温度为0～10℃。

优选的是：步骤(5)中烘干温度为100～110℃。

本发明用剑麻皂苷水解酶来水解剑麻皂苷，释放出剑麻皂素，然后将剑麻皂素提取出来。与强酸法制备剑麻皂素的工艺相比，酶法制备剑麻皂素具有环保、专一性高等特点，本发明提取出的剑麻皂素，不用强酸，没有酸污染，工艺简单，易于扩大生产规模。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。这些实施例仅用于说明本发明，而非用于限制本发明的范围。此外，在阅读本发明的内容后，本领域的技术人员可以对本发明作各种修改，这些等价变化同样落于本发明所附权利要求书所限定的范围。

实施例1