[发明专利]可分泌抗GST单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，尤其是涉及一种可分泌抗GST单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。

背景技术

梅毒是一种性传播疾病，是由苍白（梅毒）螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起的慢性、系统性性传播疾病（VD，STD）。梅毒的临床表现多种多样，且时隐时显，病程可持续很长，几乎可侵犯全身各器官，造成多器官病变、功能失常、组织破坏甚至死亡。早期主要侵犯皮肤及粘膜，晚期可侵犯心脏血管系统及中枢神经系统。

由于梅毒是人类独有的疾病，其传染性强、危害性大。据世界卫生组织的统计，近年来梅毒的发病率呈逐年上升之势，世界每年有1200万人新感染梅毒。流行病调查的结果还表明，梅毒发病率高的地区，相应感染艾滋病毒的增长率也快。因此，梅毒已成为一个严峻的公共卫生问题。中国卫生部也要求各医疗单位对婚检、献血、输血、手术、以及饮食行业从业者进行梅毒的血清学筛查。因此，研制快速、简便、灵敏且特异的诊断试剂是当前的主要任务。目前国内对血源筛选还有部分采用RPR和TRUST方法，其主要缺点是敏感性和特异性不高，许多非梅毒性疾病，包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性迁延性肝炎等均可呈阳性反应。而荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验和梅毒螺旋体血凝试验虽大大改善了检测的特异性，但是需制备大量病原体，且质量难以控制，也不利于大规模的血液筛查工作。

目前应用比较广泛的梅毒螺旋体血清检测方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金或乳胶快速检测。此方法以抗原-抗体的特异性识别为基础。酶联免疫吸附试验(ELISA)具有灵敏度高、特异性好的优势，已经成为梅毒检测的主流方法。而胶体金或乳胶法具有快捷、方便的优势，已经应用得越来越广泛。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，已得到较为广泛的应用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试纸条的硝酸纤维素膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含有相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在硝酸纤维素膜上层析，再被包被的抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测线（T线），通过检测线的有无实现对结果的判定。

从方法学上讲，目前梅毒ELISA和胶体金用的都是标记物和标记抗原直接标记的双抗原夹心法，其存在的固有缺陷如下：

当标记物为酶、发光物质、放射性物质等小标记物时，为了提高灵敏度，需要提高标记比例，但是比例过高会使标记抗原被标记物所包裹，使得抗原表位被包埋而导致抗原活性降低，所以为了兼顾标记比例提高过程中灵敏度的提高与抗原的活性损失造成的灵敏度下降，标记比例不能无限制提高。

当标记物为较大的纳米颗粒如使用胶体金、乳胶或其他纳米颗粒类标记物时，理论上最佳的灵敏度状态是标记比例越低灵敏度越高，摩尔比为1：1时灵敏度最高，但由于直接标记过程中，标记抗原用量过低会导致标记沉淀等不易标记因素而使标记比例无法降得过低，从而导致灵敏度偏低，同时标记抗原使用量的提高也会导致特异性降低。因此，急需在现有梅毒双抗原夹心法试剂盒的上面做出进一步的改进，提高试剂盒的灵敏度的同时改善特异性。

发明内容

基于此，有必要提供一种灵敏度较高且特异性较强的梅毒检测试剂盒，以及可应用在该梅毒检测试剂盒中的可分泌抗GST（谷胱甘肽巯基转移酶）单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。

一种可分泌抗GST单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC C2013184。

上述杂交瘤细胞在制备梅毒检测试剂或检测设备中的应用。

一种由上述杂交瘤细胞分泌的抗GST单克隆抗体。

上述抗GST单克隆抗体在制备梅毒检测试剂或检测设备中的应用。

一种梅毒检测试纸，包括上述抗GST单克隆抗体。

在其中一个实施例中，所述梅毒检测试纸包括支撑薄片、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫、检测线及质控线，所述样品垫、所述金标垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸收垫从所述支撑薄片的一端向另一端依次设置在所述支撑薄片上，所述样品垫与所述金标垫部分重叠，所述金标垫与所述硝酸纤维素膜部分重叠，所述硝酸纤维素膜与所述吸收垫部分重叠，所述检测线及所述质控线设在所述硝酸纤维素膜上，且所述检测线设在靠近所述金标垫的一端，所述质控线设在靠近所述吸收垫的一端，所述金标垫上涂覆有标记物标记的所述抗GST单克隆抗体以及与所述GST单克隆抗体偶联的标记抗原，所述标记抗原是由梅毒抗原与GST构成的重组抗原，所述检测线为亲和纯化的梅毒抗原，所述质控线为羊抗鼠IgG抗体。