[发明专利]一种兔门静脉血栓模型无效
申请号: | 201310707588.X | 申请日: | 2013-12-20 |
公开(公告)号: | CN103637854A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | 魏云海;张国雷;戴利成;慎华平;吴万波;徐杰伟 | 申请(专利权)人: | 魏云海 |
主分类号: | A61D1/00 | 分类号: | A61D1/00;A61D7/00;A61K49/00 |
代理公司: | 湖州金卫知识产权代理事务所(普通合伙) 33232 | 代理人: | 裴金华 |
地址: | 313000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 门静脉 血栓 模型 | ||
技术领域
本发明涉及模型制备,尤其涉及一种兔门静脉血栓模型。
背景技术
门静脉血栓形成(portal vein thrombosis,PVT )是指发生于门静脉主干、肠系膜上静脉、肠系膜下静脉或脾静脉的血栓,是肝硬化门静脉高压症患者针对脾脏功能亢进及食管胃底静脉曲张破裂出血行脾脏切除(或联合血管断流)术后严重并发症之一[1] 。Okuda报道日本病理协会247728例患者的尸解结果,门静脉栓塞的发生率为0.55%,肝硬化患者门静脉栓塞率为6.59%,脾切除术后PVT发生率为37.5%~43.5%[2]。 一旦PVT形成可导致肝脏血流灌注不足及胃肠淤血加重,若同时合并急性肠系膜静脉血栓形成则可致肠坏死;广泛的门脉血栓将严重影响后期肝移植成功率[3]。故如何防治手术后PVT 是外科临床极为关注的问题。
CN101961465A(2011-2-2)公开了一种治疗门静脉血栓的中药,然而该中药需要服用的时间长,并且对预防门静脉血栓的作用甚微。
静脉血栓动物模型是研究体内静脉血栓形成发病机制和评价各种治疗方法疗效的重要条件。Reyers等在1980年通过结扎大鼠下腔静脉首先建立大鼠深静脉血栓形成模型。此方法是通过结扎深静脉,导致静脉血液回流障碍,局部血流淤滞、缺氧,血管内皮细胞损伤,启动凝血过程。何晓凡采用单纯下腔静脉结扎法建立深静脉血栓家兔模型。Knight等采用静脉异物法建立犬、兔动物模型。具体方法为暴露静脉后,于其近端和远端分别上血管夹,向近心端插入自制的螺旋铜丝,缝合血管,确定血管再通后,逐层缝合。此方法暂时阻断局部血管血流,然后插入异物( 铜丝) ,启动内、外源性凝血过程,促发静脉血栓形成。此外还有机械打击损伤法、电流损伤法、血栓诱导剂致血栓形成法、球囊损伤法等诸多方法。文献报道兔造模后静脉血栓形成时间为22.3±2.5 min,成模率为65%。综合文献报道,制备兔静脉血栓模型者远少于大鼠静脉血栓模型, 而兔门静脉血栓模型的制作更加稀少,可能与其制作方法复杂、费用高、造模术后管理困难等有关。
发明内容
本发明的目的是提供一种形成时间短、能够有效观察血栓形成大小的兔门静脉血栓模型。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
兔门静脉血栓模型,其采用门静脉结扎置管法建立兔门静脉血栓模型;
①实验动物:健康,雌雄不限,清洁级新西兰白兔50只,体重2-4kg;
②实验过程:
A、术前准备:术前实验兔禁食过夜,自由饮水;
B、麻醉方法:氯胺酮(2 ml/支,100 mg)和咪唑安定(5 ml/支,5mg)各2ml等体积混合液后,再以生理盐水1倍稀释,经耳缘静脉注射,并观察兔反应,当发现其头部下垂时即停止注射,30 min后若发现兔有苏醒躁动征象,可在不超过安全用量(两种药物安全用量:氯胺酮50 mg/kg,咪唑安定5 mg/kg)情况下,追加上述药物;
C、手术方法:麻醉后进行施术区备皮、消毒等术前准备,逐层进腹,分离门静脉,经自制半套管式置管法插入2Fr的颈内静脉导管,以导管为内支撑,3-0线结扎门静脉,每间隔1分钟结扎2分钟,共3次,撤除结扎线,导管以6-0 Prolene线缝合固定,并引出体外,牢固固定。
兔门静脉血栓模型评估药物防治血栓作用的方法,其随机分组后分别于血栓形成前及溶栓过程中应用 rPSLG-Ig,并收集实验组与对照组血栓形成时间、成栓率、血栓大小、溶栓后血管再通率及各时间点P-sel等观察指标,以此评价rPSLG-Ig在预防PVT形成及溶栓过程中作用;
① 门静脉血栓数据的获取:
A、通过实验兔动态门静脉造影获取血栓形成时间、部位及血栓再通率:造模或局部溶栓治疗后各时点将术后门静脉血栓模型兔蒙眼后置于大小合适的纸板盒内,将动脉延长管排气后与导管连接,并引至盒外以备用,造影剂量为30%优维显5ml等量稀释1倍后缓慢注入,以55KV、63mA及160mS为血管造影条件射片,动态观察门静脉成栓时间、部位范围及局部溶栓后血管栓塞再通情况,从而评价其药物预防作用和溶栓疗效;
B、通过实验兔门静脉解剖获取血栓大小:经兔耳缘静脉注射麻醉后,解剖显露门静脉,白炽灯光源透视照射下观察,结合挤压试验判定门静脉系统血栓形成部位,完整切除门静脉并纵向剖开血管,取出门脉血栓标本,测量其大小;按大小分为4等级:0级为无血栓,1级为纵径长小于等于0.5cm,2级为纵径长0.6-1.5cm,3级为纵径长1.6-2.0cm,4级为纵径长大于等于2.1cm;
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