[发明专利]一种具有抗血小板聚集活性的提取物

说明书

技术领域：

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种提取物及其制备方法，以及该提取物在抗血小板聚集作用方面的应用。

背景技术：

血小板是一种多功能细胞，是由骨髓中成熟的巨核细胞的细胞质脱落而成，平均分布在血液中，具有粘附、聚集、释放和分泌颗粒内容物(如5-羟色胺，ADP)的功能。在血栓形成的过程中，血小板的粘附起着重要的始动作用，随之又激发了内源性与外源性的凝血过程。当血流缓慢、涡流形成、血液凝固性增高及心血管内膜受损等诸多因素出现时，或以某种因素为主时，靠近血管内皮的血小板则黏附在裸露的胶原纤维上，并释放ADP和血栓素A2，促使更多的血小板黏附，但当凝血过程启动后，血浆中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白，后者使血小板牢固地凝集于受损内膜表面。上述过程反复进行，血小板黏集堆不断增大、增多，构成多个血小板小丘，阻塞血流，从而引起血栓。因此血小板聚集性是预示血栓形成趋势的重要参数，血小板活化聚集可导致或促进某些疾病的发生和发展，所以，对于抗血小板药物的研究具有很重要的意义。

麦冬为百合科植物麦冬的干燥块根，其味甘、微苦，微寒，归心、肺、胃经，具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦之功效，临床用于治疗支气管炎、肺炎等炎症性疾病以及心律失常及心肌缺血等心血管疾病。药理研究表明麦冬正丁醇萃取部位能加强心肌收缩力、改善血液流态及增强冠脉血流量，并对心血管内皮细胞有一定的保护作用，从而具有一定的抗心肌缺血、抗心律失常以及抗血栓作用。现代药理实验证明麦冬中所含的单体成分具有明确的药理活性，如麦冬皂苷D具有抗氧化活性，短葶山麦冬皂苷C具有明确的抗肿瘤细胞转移的作用和麦冬皂苷B可以抑制肺癌细胞的生长等。但单体类成分制备过程较繁琐，得率很低，且成本较高。所以我们选用该提取物作为出发点，优化其分离及制备提纯方法，目的是可以得到具有治疗效果明确的、可以直接用于医疗领域、并被制作成各种制剂的新活性成分，使其原料得到充分的利用。

发明内容：

本发明的目的是提供一种抗血小板聚集的提取物。

本发明的目的还在于提供上述提取物在抗血小板聚集方面的应用。

本发明经过大量实验筛选，优选出提取物及其制备方法，制备方法包括：以麦冬药材为原料，以相对于麦冬原料重量至少2倍量的有机溶剂提取，提取液离心，通过大孔树脂柱，先以水洗脱至糖反应为阴性，再以<50％乙醇除杂，最后以≥50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥即得。

上述以有机溶剂提取过程中，选用的溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮、丁醇，本发明通过多个实施例更优选为乙醇提取。

上述提取过程中，提取方法可以为回流、超声、浸渍等，本发明优选采用回流法提取。

上述提取过程中所用的乙醇为一定浓度的乙醇水溶液，更优选为50％-95％的乙醇溶液提取。

上述提取过程中，以麦冬药材重量至少2倍量的溶剂提取，经过大量实验优化，本发明更优选为5-30倍量的乙醇溶液提取。

上述分离过程所选用的树脂包括D101、AB-8、HPD100、D4020、NK-9，本发明经过大量实验更优选为D101型大孔树脂分离。

上述分离过程中，麦冬药材与大孔树脂的料液比为1∶0.8～5，更优选为1∶1～2。

由于麦冬含糖量较高，过滤较不方便，容易受温度的影响，所以提取液在上柱之前直接采用离心技术，弃去不溶物，取上清液，过大孔树脂柱分离。洗脱的步骤主要为，先用水洗脱至α-萘酚反应为阴性，再以<50％乙醇除杂，最后用≥50％乙醇溶液洗脱，洗脱时收集洗脱液一般为至少1倍柱体积。本发明通过优选实施例，更优选为1-19倍柱体积，即可达到本发明的目的和效果。上述柱体积是指大孔树脂填料的体积。

本发明提供的提取物，尽可能除去糖类和小分子及低极性化合物等杂质，具有显著的抗血小板聚集活性。

本发明还提供了该提取物在抗血小板聚集方面的应用，为抗凝血药物的研究提供依据。以下是试验方法与结果：

麦冬提取物抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集活性

实验动物：家兔

诱导剂：二磷酸腺苷(ADP)

方法和结果：