[发明专利]生产核黄素的氮源、培养基及培养方法

权利要求书

1.一种生产核黄素的氮源获取方法，其特征在于，核黄素发酵液经提取后的废水经过脱盐处理，脱盐后废水总盐份控制在5g/l以下，加入2%～5%聚合硫酸亚铁絮凝1～2小时，以双锥卧螺离心机离心过滤，得到固相物，经干燥得到菌体蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种生产核黄素的氮源获取方法，其特征在于，所述脱盐处理采用纳滤或电渗析。

3.一种核黄素种子培养基，其特征在于，淀粉葡萄糖20g/l；菌体蛋白12g/l；酵母粉5g/l；硝酸钠 5g/l；硝酸胺  5g/l；磷酸二氢钾1g/l；磷酸氢二钾3g/l；七水硫酸镁0.5g/l；氯化钙0.1g/l；氯化亚铁 0.05g/l；七水硫酸锌0.03g/l；氯化锰  0.02g/l；pH6.7～6.9。

4.一种核黄素发酵培养基，其特征在于，淀粉葡萄糖120g/l；菌体蛋白40g/l；酵母粉10g/l；硝酸钠15g/l；硝酸铵5g/l；磷酸二氢钾2g/l；磷酸氢二钾4.5g/l；七水硫酸镁1.0g/l；氯化钙0.2g/l；氯化亚铁 0.05g/l；七水硫酸锌0.03g/l；氯化锰  0.02g/l；甜菜碱0.012g/l；pH6.7～7.1。

5.一种核黄素发酵培养方法，其特征在于，包括：

1）将种子培养基装入10 m3种子罐，消毒完成后，接入制好的枯草芽苞杆菌孢子悬浮液，在37～39℃下120～140rpm好氧培养12～16h。在种子液菌丝分裂、镜检正常，无杂菌，各项检测数据、指标都达到工艺要求的前提下，消好种子罐至发酵罐的连接管道，准备移种；

2）将发酵培养基用泵通过连接管道经磁化装置抽入200m3发酵罐中，消毒、灭菌后补入灭菌消毒磁化好的无菌葡萄糖液，使发酵罐培养基的初糖浓度达到15g/L，用液氨调节PH至6.7～7.1，控制通气比（VVM）为1∶0.6；移入已培养好的正常种子液，发酵体积控制在120～150m3，开始发酵，保持发酵培养温度在37～39℃，控制发酵过程中的糖量，然后增补加30%浓度已灭菌和磁化的葡萄糖液；启动机械搅拌，搅拌转速由110rpm渐增至130rpm，维持罐内溶解氧在20%～30%之间。

6.根据权利要求5所述的一种核黄素发酵培养方法，其特征在于，所述发酵过程中的糖量控制为0～24小时，葡萄糖浓度10～15g/L之间；24～32小时，葡萄糖浓度5～8g/L之间；32～40小时葡萄糖浓度2～5g/L之间；放罐前两小时停糖，残糖量要求调控在1～2g/L。以30%～60%的玉米淀粉糖液进行限制性流加补料。

7.根据权利要求5所述的一种核黄素发酵培养方法，其特征在于，葡萄糖液经过0.03～0.08T的磁场磁化。

8.据权利要求5所述的一种核黄素发酵培养方法，其特征在于，所述磁化装置的磁场强度为0.03～0.08T。