[发明专利]一种高活性的甲基对硫磷水解酶突变体及其应用在审
| 申请号： | 201310714107.8 | 申请日： | 2013-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN104726426A | 公开（公告）日： | 2015-06-24 |
| 发明（设计）人： | 郑春杨;王磊;鲍蓬;张先恩;张治平;王殿冰;王琳 | 申请（专利权）人： | 北京百川飞虹生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;C11D3/386;A23L1/015;B09C1/10 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 100102 北京市朝阳*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 活性 甲基 对硫磷 水解 突变体 及其 应用 | ||
1.一种重组甲基对硫磷水解酶突变体，其特征在于，以说明书中所附的序列2为参考序列，其具有选自第6位、第14位、第82位和第158位的至少一个突变，并且以甲基对硫磷为底物其具有比亲本高出至少80％的甲基对硫磷水解酶突变体活性。
2.权利要求1所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中第6位的R突变为H。
3.权利要求1所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中第14位的R突变为P，第82位的G突变为D。
4.权利要求1所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中第158位的S突变为Q。
5.权利要求1所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其具有说明书所附序列表中序列2至序列4之一所示的氨基酸序列。
6.根据权利要求5所述的甲基对硫磷水解酶突变体，进一步包括至少一个共价连接至所述蛋白的聚乙二醇(PEG)部分。
7.根据权利要求6所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中所述PEG部分连接至所述蛋白的半胱氨酸位点。
8.根据权利要求6或7所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中所述PEG部分是(PEG)n。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的甲基对硫磷水解酶突变体，其中所述PEG部分是一种PEG衍生物。
10.一种DNA，其含有编码权利要求1-4任一项所述的甲基对硫磷水解酶突变体的核苷酸序列。
11.一种包括权利要求10所述的DNA的表达载体。
12.一种包括权利要求10所述的DNA的宿主细胞。
13.一种利用权利要求11所述的表达载体转化的宿主细胞。
14.根据权利要求12或13所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为原核细胞。
15.根据权利要求15所述的宿主细胞，其中，所述宿主细胞为大肠杆菌。
16.权利要求1-4任一项所述的甲基对硫磷水解酶突变体的应用，其应用于以甲基对硫磷等有机磷农药为对象的家庭用果蔬农药清洗剂。
17.权利要求1-4任一项所述的甲基对硫磷水解酶突变体的应用，其应用于以甲基对硫磷等有机磷农药为对象的果蔬、茶叶和中药原材料等加工过程的农药去除剂。
18.权利要求1-4任一项所述的甲基对硫磷水解酶突变体的应用，其应用于以甲基对硫磷等有机磷农药为对象的农药去除的土壤修复剂。
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