[发明专利]里氏木霉发酵生产纤维素酶的方法及其菌株应用有效
申请号: | 201310716987.2 | 申请日: | 2013-12-23 |
公开(公告)号: | CN103740680A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 李洪兵;李贵骏;胡永明;易继云;刘文明 | 申请(专利权)人: | 湖南鸿鹰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12R1/885 |
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地址: | 415400 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 里氏 发酵 生产 纤维素酶 方法 及其 菌株 应用 | ||
1.里氏木霉发酵生产纤维素酶的方法,其特征在于,所述里氏木霉为保藏编号CCTCC NO:M2013540的菌株,具体方法如下:CCTCC NO:M2013540纯化菌株按5%的接种量接种于发酵培养基中,逐级扩大培养制备种子液,培养时间为72-96小时;种子液按发酵液体积5-10%的接种量接种于发酵培养基中,20-35℃培养96-144小时,即里氏木霉发酵生产纤维素酶结束;将发酵液在4000-6000rpm离心,收集所得液体为粗酶液;得到的粗酶液进行超浓缩过滤,得到浓缩酶液。
2.根据权利要求1所述的里氏木霉发酵生产纤维素酶的方法,其特征在于,所述发酵培养基制备方法为:纤维素粉10%、硫酸铵0.5%、硫酸镁0.025%、磷酸二氢钾0.1%、氯化钠0.01%、其余为水,pH值5-6,121℃灭菌20min。
3.根据权利要求1或2所述的里氏木霉发酵生产纤维素酶的方法,其特征在于,所述粗酶液中纤维素酶的外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶活力分别达到680U/mL、1389U/mL、486U/mL和792U/mL。
4.据权利要求1或2所述的里氏木霉发酵生产纤维素酶的方法,所述菌株产纤维素酶的pH3.0-6.0;温度为23~35℃。
5.要求1-4所述菌株里氏木霉(Trichoderma reesei)CCTCC NO:M2013540在纤维素酶发酵生产中的应用。
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