[发明专利]利用农杆菌获得转基因籼稻的方法及其专用培养基

权利要求书

1.用于制备转基因植物的试剂盒，包括诱导培养基、感染液体培养基、共培养培养基、恢复培养基、筛选培养基、预分化培养基、分化培养基和生根培养基；

所述诱导培养基由CC液体基本培养基、终浓度为2mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸终浓度为20g/L麦芽糖和终浓度为3g/L植物凝胶组成；

所述感染液体培养基由终浓度为2950mg/L KCl、终浓度为150mg/L CaCl₂.2H₂O、终浓度为250mg/LMgO₄.7H₂O、终浓度为150mg/LNaH₂PO₄.H₂O、终浓度为3mg/LH₃BO₃、终浓度为10mg/LMnSO₄.H₂O、终浓度为0.025mg/LCoCl₂.6H₂O、终浓度为0.025mg/LCuSO₄.5H₂O、终浓度为2mg/L ZnSO₄.7H₂O、终浓度为0.25mg/L NaMoO₄.2H₂O、终浓度为0.75mg/LKI、终浓度为27.8mg/L FeSO₄.7H₂O、终浓度为37.3mg/LNa₂-EDTA.2H₂O、终浓度为0.4mg/L维生素B1、终浓度为0.5mg/L维生素B6、终浓度为0.5mg/L烟酸、终浓度为100mg/L肌醇、终浓度为500mg/L水解酪蛋白、终浓度为68.5g/L蔗糖、终浓度为36g/L的葡萄糖、终浓度为176.7mg/L的L-精氨酸、终浓度为900mg/L的L-谷氨酰胺、终浓度为300mg/L的L-天冬氨酸、终浓度为20mg/L的乙酰丁香酮和水组成；

所述共培养培养基由CC液体基本培养基、终浓度为10g/L葡萄糖、终浓度为2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、终浓度为30g/L蔗糖、终浓度为3g/L植物凝胶和终浓度为20mg/L乙酰丁香酮组成；

所述恢复培养基由CC液体基本培养基、终浓度为2mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、终浓度为20g/L麦芽糖、终浓度为3g/L植物凝胶、终浓度为0-200mg/L特美汀、终浓度为0-250mg/L头孢霉素组成，

所述筛选培养基由CC液体基本培养基、终浓度为2mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、终浓度为5g/L蔗糖、终浓度为25g/L甘露糖、终浓度为3g/L植物凝胶、终浓度为0-200mg/L特美汀和终浓度为0-250mg/L头孢霉素组成；

所述预分化培养基由CC液体基本培养基、终浓度为2mg/L NAA、终浓度为1mg/L6-BA、终浓度为20g/L麦芽糖、终浓度为3g/L植物凝胶和终浓度为5mg/L ABA组成；

所述分化培养基由CC液体基本培养基B、终浓度为1mg/L NAA、终浓度为2mg/L6-BA、、终浓度为20g/L麦芽糖、终浓度为3g/L植物凝胶和终浓度为1mg/L KT组成；

所述生根培养基由终浓度为950mg/LKNO₃、终浓度为825mg/LNH₄NO₃、终浓度为220mg/LCaCl₂.2H₂O、终浓度为185mg/LMgO₄.7H₂O、终浓度为85mg/L KH₂PO₄、终浓度为6.2mg/LH₃BO₃、终浓度为16.9mg/LMnSO₄.H₂O、终浓度为0.025mg/LCoCl₂.6H₂O、终浓度为0.025mg/LCuSO₄.5H₂O、终浓度为8.6mg/L ZnSO₄.7H₂O、终浓度为0.25mg/L NaMoO₄.2H₂O、终浓度为0.83mg/L KI、终浓度为27.8mg/L FeSO₄.7H₂O、终浓度为37.3mg/L Na₂-EDTA.2H₂O、终浓度为0.4mg/L维生素B1、终浓度为0.5mg/L维生素B6、终浓度为0.5mg/L烟酸、终浓度为100mg/L肌醇、终浓度为20g/L蔗糖、终浓度为0.5mg/L NAA、终浓度为3g/L植物凝胶和水组成；

所述CC液体基本培养基B为将所述CC液体基本培养基中的36.34g/L甘露醇替换为20g/L山梨醇；

每1L所述CC液体基本培养基由1212mg KNO₃、640mgNH₄NO₃、588mg CaCl₂.2H₂O、247mg MgO₄.7H₂O、136mg KH₂PO₄、27.8mg FeSO₄.7H₂O、37.3mg Na₂-EDTA.2H₂O、3.1mg H₃BO₃、11.15mg MnSO₄.4H₂O、5.76mg ZnSO₄.7H₂O、0.83mgKI、0.24mg NaMoO₄.2H₂O、0.025mgCuSO₄.5H₂O、0.028mg CoCl₂.6H₂O、6mg烟酸、8.5mg维生素B1、1mg维生素B6、100mg肌醇、300mg水解酪蛋白、2.878g脯氨酸、500mg谷氨酰胺、36.43g甘露醇和水组成，用水补足体积。