[发明专利]能源柳组织培养快速繁殖方法无效
| 申请号： | 201310718262.7 | 申请日： | 2013-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN103733997A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 裴乐乐;张留恩;吴珊珊;金波昌;张志永 | 申请（专利权）人： | 镇江山水湾生态农业开发有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 镇江京科专利商标代理有限公司 32107 | 代理人： | 夏哲华 |
| 地址： | 212125 江苏省镇江市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 能源 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种能源柳组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
A：外植体的选取：外植体取自扦插培养的新生枝条；
B、外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗,用无菌水冲洗1次，然后用0.1%氯化汞消毒，无菌水冲洗；
C、初代培养：经过消毒的外植体切成2-3cm的小段,每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+ 0.8 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA，培养室温度20-25 ℃,光照强度2000-3000Lx,光照12-14h/d，培养20-25d；
D、增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，培养条件如步骤3，培养30-40d；
E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2-3cm的小段，接入生根培养基中生根培养，前10d弱光培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养35-40d；
F、炼苗和移栽：当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，保持温度20-25℃，湿度80-90%，并用遮阳网遮阴。
2.按照权利要求1所述的能源柳组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤B中，外植体茎段去叶并置于流水下冲洗2.5-3.5小时，用75%的乙醇溶液中清洗25-35s,用0.1%氯化汞消毒6-8min，无菌水冲洗4-5次。
3.按照权利要求1所述的能源柳组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤F中，在室温下培养6-8d。
4.按照权利要求1所述的能源柳组织培养快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤F中，蛭石草炭土的体积比1:1。
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