[发明专利]过敏性疾病变应原胶体金诊断试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及变应原检测领域，具体地说，涉及一种过敏性疾病变应原胶体金诊断试纸条及其制备方法。

背景技术

变应性疾病（又称过敏性疾病）包括特应性皮炎、食物过敏、变应性鼻炎和过敏性哮喘等，其发病率日益增高，且病情逐趋复杂化。WHO已将变应性疾病列为21世纪重点研究和防治的疾病。近年，随着免疫组化、分子生物学技术和临床新技术，如纤维支气管镜的开展，已对此病有了共识，即其属于过敏性炎症，在炎症区有大量炎症细胞（包括嗜酸粒细胞、淋巴细胞、肥大细胞、嗜碱粒细胞等）浸润。该病发病主要涉及变应原、抗体、细胞、受体和介质5个环节。当过敏原激发后，在15～20分钟所发生的速发相反应主要与肥大细胞有关，而在激发后4～24小时所发生的迟发反应则被认为有嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞参与。这两个时相的反应均依赖于T淋巴细胞，特别是辅助T细胞（TH）中的一个亚型TH₂。变应原是引起过敏性炎症的原因，因此若能发现致敏变应原种类，则对防治过敏性疾病具有重要意义。

过敏性疾病大多为I型变态反应性疾病，是临床多发病症，具有季节性和区域性高发的特点。多因吸入尘螨、植物花粉、毛屑等变应原或因呼吸道感染病原微生物感染而引起。

呼吸道过敏反应最常见的典型疾病是变应性鼻炎和支气管哮喘。支气管哮喘在许多国家其患病率和死亡率有增加的趋势，如美国、英国、澳大利亚、新西兰等国近一年内的哮喘发生率在10-30%之间。2003年中国城区儿童哮喘患病率调查结果显示：0-15岁儿童哮喘现患病率为0.12～3.34%，全国平均为1.54%；累计患病率为1.97%，与10年前（1988～1990抽样调查，0.11～2.03%）相比明显增加。70%患儿首次喘息发作在3岁内；以呼吸道感染和过敏为诱因导致发作者占94.62%，分析认为其中部分可能为过敏性鼻炎症状。该调查显示，哮喘给患儿、患儿家庭和社会经济造成了严重的影响。病人及家长医疗需求迫切。关于哮喘的诱发因素，大量研究表明，过敏是致喘的重要因素，其中尘螨、室尘、花粉较为重要。

特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）是儿童期最常见的一种慢性皮肤炎症，全世界儿童5%～20%患有特应性皮炎，其中60%进入青春期后仍有特应性皮炎表现。将近80%患者有发生呼吸道变态反应的危险，包括变应性鼻炎和哮喘。吸入性变应原，包括室内尘螨和动物皮毛，是特应性皮炎的潜在诱因。在一项双盲对照研究中，Tan等发现尘螨避免可改善特应性皮炎。由此可见，进行皮肤点刺试验或特异性血清IgE测定对确定特应性皮炎患者是否有气传变应原变态反应及采取合适的变应原避免措施非常有效。

慢性荨麻疹、湿疹是常见的复发性、过敏性皮肤病，病因复杂，往往无法根治，易复发；前者为机体接触变应原后发生I型或III型变态反应及非变态反应两条途径致病，后者是由内外激发因子引起的一种迟发型变态反应。其中60～80%发病与特异性变应原有关，一次变应原的作用是发病关键，若能及时检测出患者的变应原，对预防和治疗这类疾病极有意义。

过敏性疾病变应原的诊断方法分为体内试验和体外试验，体内试验有皮内试验和点刺试验两种方法。体外试验的方法主要有免疫印迹、酶联免疫分析发、放射性免疫分析法和荧光免疫分析。

皮肤试验的原理是使微量无害的变应原进入皮肤，与皮下肥大细胞表面的特异性IgE抗体结合，经过一系列的酶激活，使肥大细胞脱颗粒，释放组胺等多种化学介质，从而使局部血管扩张、通透性增加，出现丘疹和红晕反应。临床上根据反应情况，对I型变态反应性疾病的病因进行诊断。其试验的方法有多种，较常用的有皮内试验和皮肤点刺试验（SPT）。皮内试验变应原液是进入真皮，而SPT变应原液仅进入表皮。

过敏性疾病变应原的诊断，是一个系统性排除筛查试验，往往为了确诊患者的过敏原，需要进行几十种疑是变应原的筛查，初次筛查利用体内皮肤试验，会给患者带来很大不必要的痛苦。在过敏性疾病变应原诊断的流程中，先通过体外诊断试纸条初筛确诊具体变应原，然后通过体内试验确认过敏变应原。因此过敏性疾病变应原体内诊断和体外诊断的方法是相辅相成，体外诊断避免了用体内试验带来的不必要痛苦和危害。

过敏性疾病变应原体外诊断的主要原理为变应原与患者血清中的特异性IgE结合，然后再与酶标、放射性同位素标记、荧光素标记的二抗结合，再与底物反应，病人血清中的特异性IgE与底物反应的强度成正比。