[发明专利]一株高抗逆性屎肠球菌及其应用

说明书

本发明涉及一株高抗逆性屎肠球菌及其应用。屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI‑9CGMCC No.7455分离自60日龄仔猪粪便，能够耐受低pH环境和高浓度猪胆盐，可以在胃肠消化液中长时间保持活性。本发明的屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI‑9CGMCCNo.7455对大肠杆菌、沙门氏菌、藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用，抑菌圈直径达到30‑40mm。借此开发的微生态活菌制剂具有显著的益生特性，可以用于调节畜禽肠道微生态平衡，并在预防或辅助治疗畜禽细菌性腹泻有着广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种屎肠球菌，特别是涉及一株高抗逆性屎肠球菌及其应用。

背景介绍

食品安全已是人们越来越关注的问题。饲料作为动物的食品和人类的间接食品，成为食品安全工程的重要一环。我国已启动“饲料安全工程”，并禁用了一批毒性和残留较大的饲料添加剂产品。加快安全性较高的新型饲料添加剂产品的开发与生产，对于实现健康养殖及养殖业可持续发展具有重大的现实意义。微生态制剂作为一种绿色、安全的饲料添加剂受到人们的广泛关注，对于动物健康和养殖业的促进作用正在逐渐的显现出来。

然而，目前市售微生态制剂产品质量参差不齐，很多产品所用菌种对胃肠消化液、胆盐耐受能力差，真正能够到达小肠发挥功效的菌种很少。为了提高产品效果，不少企业推出微囊化的微生态制剂产品，虽然提高了进入小肠的活菌数，但也大幅增加了生产成本。开发对胃肠消化液、胆盐有高耐受性的益生菌菌株能大大简化生产工艺，降低生产成本。

屎肠球菌是农业部《饲料添加剂品种目录》所列菌种，可以在微生态制剂中安全使用。屎肠球菌具有很强的产酸能力，是动物体内天然存在的有益乳酸菌之一，能够维持宿主肠道微生态平衡，抑制肠道病原菌的大量增殖，能够刺激肠道粘膜免疫，提高机体的抗病能力，产生有益的代谢产物，防止有害物质产生，改善机体健康水平。

因此，开发一种能够耐受胃肠消化液和胆盐，并对病原微生物有较强抑菌活性的屎肠球菌菌株，对于降低微生态制剂生产成本，强化微生态制剂功效具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一株可用于调节畜禽肠道微生态平衡及预防畜禽细菌性腹泻的高抗逆性屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9CGMCC No.7745。

从健康仔猪粪便中分离、筛选得到一株乳酸菌，经16S rDNA测序鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9，并于2013年6月19日送中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCC No.7745，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所邮编：100101电话：86-10-64807596。

屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9CGMCC No.7745属革兰氏阳性细菌，圆形或椭 圆形，呈链状排列，无芽孢，无鞭毛。生长温度范围在30-40℃，适宜pH值的范围6.0-7.5，是兼性厌氧乳酸菌。该菌株在常规和改良MRS培养基中生长良好，繁殖速度快，在改良MRS培养基中的生长曲线如图1所示，2h后进入对数期，14h菌数增殖达到最高，稳定期活菌数为0.98×10⁹-1.2×10⁹CFU／mL。所述改良MRS配方为：每1000mL水中加入蛋白胨10g，牛肉粉5g，酵母粉5g，葡萄糖20g，吐温801mL，K₂HPO₄·7H₂O2g，NaAC·3H₂O5g，柠檬酸铵2g，MgSO₄·7H₂O0.58g，MnSO₄·H₂O0.25g，pH6.8。