[发明专利]一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术无效
| 申请号： | 201310720309.3 | 申请日： | 2013-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN103789378A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 张佳;张佩舜;李奠础;郑丽萍;张富刚;康振奎;王晓艳;冯俊敏;巩晋龙;王小鹏 | 申请（专利权）人： | 山西天骄食业有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/24 | 分类号： | C12P19/24;C12P19/02 |
| 代理公司： | 太原高欣科创专利代理事务所(普通合伙) 14109 | 代理人： | 崔雪花 |
| 地址： | 030500 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 应用于 红枣 浓缩 生产 阿洛酮糖 双酶偶联 固定 技术 | ||
1.一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术，其特征在于按照以下步骤进行：
第一步，固定化
将定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶的混合酶液加入树脂中，每1.0g树脂加酶量：0.5~2ml混合酶液，吸附温度为25℃~35℃，吸附pH=6.5~7.5，吸附时间100~140min，然后加入交联剂，交联25~35min得到固定化酶，所述交联剂体积份数为0.03%~0.06%；所述定点突变的葡萄糖异构酶为将葡萄糖异构酶氨基酸序列的146位的精氨酸定点突变为脯氨酸得到的突变的葡萄糖异构酶；
第二步，催化红枣汁生产阿洛酮糖
将红枣汁加入所述固定化酶中，控制温度：60~70℃；pH值：5.0~7.0；所述红枣汁与固定化酶的重量份比为1-5:1；5-10小时候完成催化反应，得到D-阿洛酮糖混合液。
2.根据权利要求1所述的一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术，其特征在于：所述第一步中，混合酶液中的定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重量份比为4：1。
3.根据权利要求1所述的一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术，其特征在于：所述树脂为双酚A环氧乙烯基酯。
4.根据权利要求1所述的一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术，其特征在于：所述交联剂为戊二醛、饱和硼酸与1wt%的CaCl2溶液的混合溶液或50 wt %的NaNO3溶液和1 wt %的CaCl2 溶液的混合溶液。
5.根据权利要求2所述的一种应用于红枣浓缩汁生产阿洛酮糖的双酶偶联与固定化技术，其特征在于：所述混合酶液中定点突变的葡萄糖异构酶的浓度为1-8mg/mL。
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