[发明专利]油菜籽饼源金属螯合肽、肽金属螯合物的制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明属于油菜籽饼副产物深加工技术领域，具体是涉及一种油菜籽饼源金属螯合肽、肽金属螯合物的制备方法及用途。

背景技术

金属螯合肽(Metal chelating peptide)是指能够螯合金属离子的生物活性肽类。金属离子如铜、锌、铁等广泛存在于机体的器官和组织内。当机体内存在过量的金属离子时，容易导致活性氧(Reactive oxygen species，ROS)的产生，进而损伤机体内的生物大分子，产生一些退行性疾病，如心脑血管疾病、胃肠炎症和癌症等。金属螯合肽本身能够螯合机体内游离的金属离子，起到抑制或降低体内活性氧致氧化损伤的作用。此外，许多微量金属元素是机体代谢用酶的重要组成部分，当机体内微量金属元素不足时，也会产生一系列疾病。例如，缺锌时，会影响机体内的DNA聚合酶、RNA合成酶和超氧化物歧化酶等的合成及转化，对人体的生长发育产生不利影响。

金属螯合肽能够通过与金属离子发生螯合作用，制备形成肽金属螯合物(Peptide-metal chelator)。该螯合物被称为第四代微量元素补充剂，它是相对于第一代以无机盐类添加剂，如硫酸铜、硫酸锌等，第二代以简单的有机酸盐，如葡萄糖酸锌、富马酸亚铁等，第三代氨基酸微量元素螯合盐来说的。

肽金属螯合物，可以通过肽的吸收途径转运进入机体内。肽的吸收具有速率快、路径多和与氨基酸无竞争性的优点。因而，螯合物能够显著地提高微量金属元素的生物利用率，并有效地达到补充机体所需微量元素的目的。目前，关于金属螯合肽及其螯合物的研究是科学家们广泛关注的热点，尤其是具有优异的金属螯合能力的活性肽的制备，更是该领域研究的重点。

菜籽饼是油菜籽榨油后的副产物，其中含有30％～50％的蛋白质，目前，关于蛋白提取的方法较多，例如，在中国专利CN1962671A和CN102296099中公布了碱溶酸提法提取菜籽蛋白的方法，在CN200510056753.5中，公布了先后用水和乙醇制备菜籽蛋白的方法。此外，还有制备第三代微量元素螯合物的方法，如在CN1115311A中，申请者将菜籽饼进行水解、中和和螯合反应，制备出氨基酸及氨基酸螯合物。

可见，以菜籽饼加工副产物中的蛋白资源为原料，进行精深加工，制备肽金属螯合物，可以进一步解决高值化利用菜籽饼副产物的问题，制备出高效的微量元素补充剂。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本发明的目的之一在于提供一种油菜籽饼源金属螯合肽。

为了实现该目的，本发明所采用的技术方案是：一种油菜籽饼源金属螯合肽的制备方法，步骤如下：

①、油菜籽饼依次采用乙醇和水浸泡、清洗，固液分离保留滤饼，得到油菜籽蛋白粗品；

②、按料液重量比为1∶2～1∶30向油菜籽蛋白粗品中加入水，调节pH值至1.5～10.0；

③、按蛋白酶与底物重量比为1∶200～1∶20再加入蛋白酶，调节温度至37～60℃，进行水解反应0.5～6h，再将反应液置于沸水中煮5～10min，进行灭酶，获得水解液；

或者；

按蛋白酶与底物重量比为1∶200～1∶20再加入蛋白酶，调节温度至37～60℃，进行水解反应0.5～6h，再将反应液置于沸水中煮5～10min，进行灭酶，然后置于高压锅内于121℃高压处理2～20min，获得水解度更高的水解液；

④、将水解液离心去除残渣，获得的上清液经干燥制得金属螯合肽的粗品粉末。

优选的，油菜籽蛋白粗品的制备方法为：先将油菜籽饼粉碎成细粉，4～60℃温度条件下，按料液重量比为1∶5～1∶50将该细粉先经体积百分比为60～90％的乙醇水溶液搅拌浸泡1～48h，期间每隔一段时间更换液体，直至过滤后的液体颜色无棕色或黄色为止；去除上清液，将沉淀物采用至少5倍体积的清水进行清洗，然后过滤，直至过滤后的清水无棕色或黄色为止，进而得到呈褐色或浅黄色的油菜籽蛋白粗品。

优选的，水解反应用蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰酶、风味蛋白酶、Alcalase酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或多种的复配。

优选的，干燥方式为冷冻干燥、真空干燥或喷雾干燥。

进一步的，油菜籽饼源金属螯合肽的制备方法还包括将制得的金属螯合肽粗品粉末通过金属螯合填料进一步进行分离获得高纯度金属螯合肽的步骤，金属螯合填料采用亲和琼脂糖填料。