[发明专利]野生百合快速繁殖的组织培养方法有效
申请号: | 201310722214.5 | 申请日: | 2013-12-24 |
公开(公告)号: | CN103704136A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 明军;袁素霞;刘春;徐雷锋 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人: | 胡敬红 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 野生 百合 快速 繁殖 组织培养 方法 | ||
1.野生百合快速繁殖的组织培养方法,包括如下步骤:
(1)取蕾期幼嫩花梗,消毒除杂菌,
(2)将幼嫩花梗纵切成两半,再切成段,将纵切面放置于诱导培养基上进行诱导培养出不定芽,
(3)将诱导出的不定芽接到增殖培养基上进行增殖培养,获得丛生芽,
(4)将丛生芽接到生根培养基上进行生根培养,获得根系健壮的无菌组培苗。
所述诱导培养基为:MS+6-BA 0.5mg.L-1+NAA 1.5mg.L-1+蔗糖30.0 g.L-1+MES 2g.L-1+琼脂6.0g.L-1,pH=5.8~6.0;增殖培养基为MS+IBA 0.1mg.L-1+蔗糖60.0 g.L-1+MES 2g.L-1+琼脂6.0g.L-1,pH=5.8~6.0;生根培养基为:1/2MS+IBA 0.1mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1+MES 2g.L-1+蔗糖60.0g.L-1+琼脂6.0 g.L-1,pH=5.8~6.0。
2.根据权利要求1所述的方法,所述诱导培养条件为培养条件是温度(25±2)℃,遮光,增殖培养条件为培养条件是温度(25±2)℃,遮光,生根培养条件为培养条件是温度(25±2)℃,光照强度2000lx,光/暗周期16h/8h。
3.根据权利要求1所述的方法,所述消毒采取如下顺序步骤:先将幼嫩花梗置于含有50%多菌灵500倍液、50mg.L-1链霉素和50mg.L-1青霉素的水溶液中,150rpm振荡3~5h进行前消毒处理;然后将花梗置于75%酒精中浸泡震荡20~30s,最后放入10%次氯酸钠溶液中浸泡震荡13min,用无菌水冲洗3次,每次冲洗1~2min。
4.根据权利要求1所述的方法,所述切段的长度为1cm。
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