[发明专利]一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药材料领域，具体涉及一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽及其制备方法和应用。

背景技术

Judah folkman于1971年提出肿瘤的生长依赖于血管新生的理论，从而开创了肿瘤依赖性血管新生治疗的新纪元。越来越多的证据表明，肿瘤生长依赖于血管新生，以血管相关抗原为靶点的疫苗可以引发机体产生特异性细胞或体液免疫反应，抑制血管的形成，从而起到阻止肿瘤细胞生长和转移的作用。

血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）和刺激促红细胞生成素（EPO）是促进肿瘤血管生长作用的关键因子，是诱导血管生成的重要调节因素。在肿瘤的发生和发展过程中，肿瘤组织的缺氧环境会诱导VEGF和PDGF的表达，释放的VEGF和PDGF等血管生成刺激因子反过来刺激血管生成并为肿瘤组织供氧，其中，PDGF与其受体结合后，又可刺激EPO的分泌，EPO可促进红细胞生成，从而进一步为肿瘤的生长及转移提供足够的氧气。

目前，同时针对VEGF、PDGF和EPO三种靶点的疫苗还未见报道，因此，有必要提供一种能同时针对VEGF、PDGF和EPO三种靶点的疫苗及治疗方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，该抗肿瘤血管生成免疫复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子PDGF的免疫原性表位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位，具有靶向VEGF、PDGF和EPO三种靶向位点的能力，从而更有效地抑制肿瘤生长；此外，该抗肿瘤血管生成免疫复合肽能作为主动免疫疫苗，能有效降低抗体药物免疫原性反应；本发明还提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法和应用。

第一方面，本发明提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，所述抗肿瘤血管生成免疫复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子PDGF的免疫原性表位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位。

优选地，所述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述血小板衍生生长因子PDGF的免疫原性表位选自如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示氨基酸序列中的至少一种，所述促红细胞生成素EPO的免疫原性表位选自如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示氨基酸序列中的至少一种。

优选地，所述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子PDGF的免疫原性表位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位之间通过连接肽连接。

进一步优选地，所述连接肽的氨基酸序列为GGGGS或GGGGSCGGGGS。

优选地，本发明提供的抗肿瘤血管生成免疫复合肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

具体地，SEQ ID NO:7为：

MLSDHSIRSGGGGSQVRKIEIVRKKPIFKKATGGGGSRTVRVRRPPKGKHRKFKGGGGSCGGGGSPLGLPVLGAPPRLICDGGGGSPKKDRARQEKKSVRGKGGGGSNITVPDTKVNF。

该序列组成分别标示如下：

本发明通过计算机模拟，结合生物信息学等方法设计了多种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的氨基酸序列，所述复合肽的氨基酸序列包括了VEGF、PDGF和EPO三种蛋白质的免疫原性表位。

本发明提供了以VEGF、PDGF、EPO为靶点的抗肿瘤血管生成免疫复合肽能同时靶向VEGF、PDGF和EPO三种靶向位点，比单一靶向用药更能有效抑制肿瘤血管生成，从而更有效地抑制肿瘤生长；其次，由于VEGF、PDGF和EPO三种靶向位点相互之前还具有协同作用，理论上可以联合使用单抗药物靶向多靶点进行治疗，但是有报道指出纯粹联合使用单抗药物，比如VEGF和PDGF的单抗药物，效果并不理想，而本发明提供的疫苗比单抗联合药物的效果更好。

此外，本发明提供了以VEGF、PDGF、EPO为靶点的抗肿瘤血管生成免疫复合肽能作为主动免疫疫苗，与单抗药物的被动免疫治疗相比，不仅能有效降低抗体药物免疫原性反应的风险，其主动免疫的方式还有助于引起人体更特异、更有效的免疫反应，提高免疫系统的攻击能力，从而更有效的抑制肿瘤生长；另外，该多靶点抗肿瘤血管生成免疫复合肽比传统的单一靶向的疫苗的药物耐受性更好。