[发明专利]一种G6PD缺乏症基因检测膜条以及PCR引物

说明书

技术领域

本发明涉及医学上葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD）缺乏症用的基因检测膜条及相关引物，具体涉及一种G6PD缺乏症基因检测膜条以及用于扩增待检样品基因片段的PCR引物。

背景技术

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD）缺乏症是全球最常见的一种X连锁不完全显性遗传病，估计全球有4亿人受累。该病的高发区包括地中海沿岸、非洲、东南亚及我国的南部省区。G6PD缺乏症临床上表现为新生儿黄疸、蚕豆病、药物性溶血、感染性溶血和非球形细胞溶血性贫血等疾病，在儿童及婴幼儿期集中表现为蚕豆病和新生儿黄疸，往往病情较重，如不及时救治将危及患儿生命。

目前临床上常用的G6PD缺乏症检测方法包括高铁血红蛋白还原试验、G6PD活性试验、G6PD定量比值法等，这些化学试验方法过程简单、价格低廉，适宜在基层医院开展，但准确性较差，存在假阳性或假阴性，特别对隐性携带者的孕妇易漏诊，从而造成未对出生的患儿进行应有的临床指导，危及患儿的健康或生命。

在本申请之前，已有用PCR-膜条杂交技术方法检测G6PD基因突变的技术方法，其中中国授权专利，专利号为：201110069362，公开了一种方法能检测12种突变类型，分别为：A95G、G392T、G487A、A493G、C592T、G871A、C1004T、C1024T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。中国授权专利，专利号为：201210363243专利公开了一种方法能检测13种突变类型，分别为：A95G、G392A、A493G、C592T、G871A、C1004T、C1024T、C1311T、C1360T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。这两个专利都未包括中国人群中较为重要的突变类型，因此，以上两个专利的产品都将造成较为严重的漏检，可导致影响部分患者的生命和健康的严重后果。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种G6PD缺乏症基因检测膜条，其检测范围为17个突变位点共20种突变类型（其中三个突变位点各有两种突变类型），不仅包括了现有技术中的所有突变类型，而且增加了中国人群中较为重要的突变类型。因此，应用本申请产品进行检测，将大大降低患者漏检的频率，保护患者生命和健康，并且该检测膜条检测迅速准确，极少出现假阳性或假阴性。

本发明的另一发明目的是，提供用于扩增待检样品基因片段的PCR引物，该PCR引物针对17个突变位点共20种突变类型重新设计得出，完全根据中国人群突变频率较高的的突变基因型T517C、C519T、C519G、A835G、A835T、C1004A设计，准确率高，与探针的结合性能好，扩增速率快，对于临床检测具有很强的临床指导意义。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种G6PD缺乏症的基因检测膜条，包括基底膜条以及在所述基底膜条上固定有特异性的突变探针和正常对照探针，共包括20条突变探针和13条正常对照探针，20个突变探针对应共17个突变位点，所述20条突变探针分别为：A95G、G392T、G487A、A493G、T517C、C519T、C519G、C592T、A835G、A835T、G871A、C1004T、C1004A、C1024T、C1311T、C1360T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。

其中，所述突变探针的3’端或5’端带有氨基标记，所述突变探针的具体序列为：

A95G       GGATACACGCATATTCATCA

G392T       CTCCACCTGGTGTCACAG

G871A       AGGTCAAGATGTTGAAATG

C1004T   CACCACCGTCACTTTTGCA

C1004A   CACCACCGACACTTTTGCA

C1024T      AGCCGTCGTCTTCTATGT

C1360T   GCACTTCGTGTGCAGGTGA

G1376T   GAGCTCCTTGAGGCCTGG

G1381A  GAGCTCCGTGAGACCTGG

C1387 A  CCTGGAGTATTTTCACCCC

G1388A  CCTGGCATATTTTCACCCC