[发明专利]一种富硒猴头菌菌丝体液体发酵的生产方法

权利要求书

1.一种富硒猴头菌菌丝体液体大规模发酵的培养基，其特征在于，按质量体积比为：每升液体培养基含葡萄糖25g、蛋白胨0.4g、酵母膏0.6g、KH₂PO₄2g、MgSO₄·7H₂O1.5g、亚硒酸钠0.25g，加蒸馏水至1L，分装之后灭菌使用。

2.一种富硒猴头菌菌丝体液体发酵的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）猴头菌菌种的活化：将购买于中国普通微生物菌种保藏管理中心的编号为5.0058猴头菌菌种，保存在-80℃低温冰箱中，进行液体发酵生产菌丝体之前，需要进行菌种活化，主要是利用成分为去皮马铃薯200.0g、葡萄糖20g、加蒸馏水至1000mL、pH值自然的PDA固体试管培养基在无菌操作台中进行接种，之后在25℃-28℃培养箱中静置培养96小时-144小时，获得活化后的猴头菌菌种；

（2）猴头菌的液体初级发酵：将步骤（1）中的活化后的猴头菌菌种，在超净工作台中转接于液体初级发酵培养基中，进行猴头菌的液体初级发酵培养，其中，每升猴头菌液体初级发酵培养基含有葡萄糖20g、蛋白胨0.3g、酵母膏0.6g、KH₂PO₄2g、MgSO₄·7H₂O1.5g，加蒸馏水至1L，之后分装灭菌使用，转接过程主要是利用接种环在无菌条件下从装有活化后的猴头菌的试管中，挑取一环猴头菌，接种于装有50mL液体初级发酵培养基的500mL三角瓶中，利用封口膜进行分口之后，置于25℃-28℃培养箱中静置培养15天-20天，获得猴头菌液体初级发酵产物；

（3）猴头菌的液体大规模发酵；将步骤（2）获得的猴头菌液体初级发酵产物，在无菌条件下从三角瓶中取出，置于洁净的大型号培养皿中，利用经过灭菌处理的手术刀将其截成大约1cm×1cm的菌膜块，在无菌条件下将一个菌膜块转接于一个装有100mL猴头菌液体大规模发酵培养基的1L三角瓶中，其中，1L猴头菌液体大规模发酵培养基含有葡萄糖25g、蛋白胨0.4g、酵母膏0.6g、KH₂PO₄2g、MgSO₄·7H₂O1.5g、亚硒酸钠0.25g，加蒸馏水至1L，之后分装灭菌使用，三角瓶封口之后在25℃-28℃培养箱中静置培养15天-20天，获得富硒猴头菌液体大规模发酵产物；

（4）猴头菌液体大规模发酵菌丝片的收集：将步骤（3）获得的富硒猴头菌液体大规模发酵产物，在无菌条件下利用8层纱布进行过滤处理，收集发酵产物中的菌丝片，之后，利用蒸馏水清洗3-5次，最后一次清洗之后利用8层纱布过滤处理菌丝片，并且尽可能多的除掉水分，然后，将猴头菌菌丝片置于35℃-40℃干燥培养箱中进行干燥处理24小时-48小时，获得干燥处理后的猴头菌菌丝体；

（5）猴头菌液体发酵菌丝体的粉碎：将步骤（4）获得的干燥处理后的猴头菌菌丝体，利用洁净的研钵进行研磨处理，研磨到成为较细的粉末状为止，获得富硒猴头菌液体发酵菌丝体的粉末。