[发明专利]一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶及其制备方法有效
申请号: | 201310738156.5 | 申请日: | 2013-12-27 |
公开(公告)号: | CN103725663A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 李洪兵;朱永明;易继云;周玉明;孙明芳 | 申请(专利权)人: | 湖南鸿鹰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/50 | 分类号: | C12N9/50;C12N9/42;C12N9/24;C12N9/26;C12N9/18;C12N9/88;C12N9/16;A23K1/165;A23K1/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 415400 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 碱性 聚糖 生长 专用 及其 制备 方法 | ||
1.一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶,由以下重量份数的原料组成:嗜热芽孢杆菌培养物30-50份,酸性蛋白酶35-55份,酸性木聚糖酶20-30份,β-葡聚糖酶20-30份,果胶酶20-30份,纤维素酶10-15份,淀粉酶10-15份,植酸酶10-15份,中草药提取物10-15份,保护剂10-15份,激活剂10-15份;
所述嗜热芽孢杆菌培养物的制备方法如下:将保存完好的嗜热芽孢杆菌CCTCC NO:M2013537的斜面菌种经活化和一、二、三级种子培养及一级种子罐培养逐级扩大培养得到种子液,以6%接种量接入发酵罐,培养温度37-45℃,搅拌速度200-700rpm,通风量(V/V)1:1-3,培养时间10-15h;然后以1-2℃/h降温速率缓慢降温至10-15℃,恒温培养15-20h;继续以1-2℃/h降温速率缓慢降温至2-5℃,此时,将一级种子罐发酵液以4%接种量追加接入发酵罐,恒温培养20-30h;最后以1-2℃/h升温速率缓慢升温至10-15℃,恒温培养15-20h;继续以1-2℃/h升温速率缓慢升温至37-45℃,恒温培养15-20h;发酵液经孔径10-1000μm过滤纸板粗滤,然后于10-20℃循环超滤浓缩去除水分得固形物含量20-40%浓缩液;浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得嗜热芽孢杆菌培养物;
所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖20-30份,NaCl20-30份,(NH4)2SO410-15份,半胱氨酸10-15份;
所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成:氯化锌30-40份,氯化钙10-20份,硫酸钠10-20份,氯化镁5-10份。
2.如权利要求1所述的一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶,其特征在于,所述中草药提取物的制备方法为:分别将中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃~90℃保持2~4h,然后降温至45-60℃,加入混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,控制温度至60℃~78℃保持3~4h,过滤;滤液减压浓缩至固形物含量为20%以上,然后冷冻干燥获得中草药提取物;
所述中草药的重量份数组成为:沙棘20-30份,决明子20-30份,枸杞10-15份,山药10-15份,北沙参5-10份,黄荆子5-10份,玉竹3-5份,薏米3-5份,大麦芽3-5份,桂花3-5份,黄芪3-5份;
所述混合酶添加量为混合物料总重量的5-10%;
所述混合酶的重量份数组成为:内β-葡聚糖酶10-20份,外β-葡聚糖酶10-20份,β-葡萄糖苷酶10-15份,木聚糖酶15-20份,戊聚糖酶15-20份,普鲁兰酶20-30份,β-淀粉酶10-15份,中性蛋白酶10-15份,酸性蛋白酶10-15份,超氧化物歧化酶5-10份,葡萄糖氧化酶5-10份,酸性磷酸酶5-10份。
3.如权利要求1所述的一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶,其特征在于,制备嗜热芽孢杆菌培养物的斜面培养基组成为:牛肉膏3-10g,氯化钠5-12g,蛋白胨10-20g,葡萄糖2-5g,琼脂15-20g,中草药剂粉5-10g,蒸馏水l000mL,pH值5-11,121℃灭菌20min。
4.如权利要求1所述的一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶,其特征在于,制备嗜热芽孢杆菌培养物的种子培养基组成为:酵母粉0.3-0.5%,葡萄糖1-1.5%,蛋白胨0.3-0.5%,牛肉膏0.5-0.8%,磷酸氢二钾0.8-1.5%,中草药剂粉1.5-2%,海藻糖1-3%,硫酸钙0.1%,氯化镁0.2%,柠檬酸钠0.1-0.3%,不足部分纯净水补足,pH值5-11,121-123℃灭菌30-40min。
5.如权利要求1所述的一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶,其特征在于,制备嗜热芽孢杆菌培养物的种子罐培养基组成为:麦芽糊精5-15%,酵母粉0.4-0.8%,中草药剂粉1.5-2%,海藻糖1-3%,蛋白胨0.1-0.5%,玉米浆0.1-0.5%,磷酸氢二钾0.8-1.5%,硫酸镁0.05-0.1%,柠檬酸钠0.1-0.5%,桦木木聚糖0.1-0.8%,不足部分纯净水补足,pH值5-11,121-123℃灭菌30-40min。
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