[发明专利]一种高效复合生物肥料

说明书

技术领域：

发明涉及农业技术中的肥料，特别涉及一种新型的高效复合生物肥料。

背景技术：

现有的生物肥料大多是单一性的生物肥料。如：固氮菌肥，主要由具有固氮作用的细菌和真菌组成；又如：磷细菌，其功能是分解土壤中的有机磷，使之变为易于被植物吸收的磷素；再如：细菌，其功能是分解土壤中的钾化合物，使之成为能被植物吸收利用的速效钾。这些肥料在单独使用时均能发挥各自作用，部分满足植物对氮，磷，钾三要素的需要。它们不会产生长期使用化肥所造成的土壤板结现象。但其不足在于：单独使用上述三类生物肥料只能解决植物所需营养的一个方面，且成本较高，用量大，同时，将三者配合使用，又很难做到比例适当而造成施肥量的不足或浪费。长期使用单一的或复合的生物肥料的实践证明，它们只能替代化肥的30%以下。

发明内容：

本发明的目的是提供一种能针对我国土壤肥力的基本情况，开发一种高效复合生物肥料。

本发明的技术方案是：

一种高效复合生物肥料，由黑曲霉培养物、解磷巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌菌剂组成，高效复合生物肥料的重量份数组成为黑曲霉培养物20-50份、解磷巨大芽孢杆菌5-10份、枯草芽孢杆菌菌剂10-30份；

所述高效复合生物肥料由以下方法制备，将特选的黑曲霉培养物、解磷巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌分别进行培养、发酵，然后将发酵产物按比例组合为高效复合生物肥料。

解磷巨大芽孢杆菌是芽孢杆菌属（Bacillus）中的一个种。运动，形成荚膜，好氧。从葡萄糖产酸，也常从阿拉伯糖和甘露醇产酸。水解淀粉，不产生卵磷脂酶，VP阴性。能分解土壤中的有机磷成为植物可利用的速效磷。

解磷巨大芽孢杆菌菌剂由沧州旺发生物技术研究所提供，地址：中国河北沧州市运河区解放西路颐和国际商务中心A座1区807-812。

黑曲霉培养物制备：菌种培养，采用常见固体发酵培养方法：孢子液接种到固态发酵培养料中，26-35℃培养至菌丝长满培养料，低温流化床干燥，粉碎干燥物。

有益效果：

实验表明，使用本品可提高粮食产量8-30%，提高蔬菜产量10-40%，还可改善蔬菜、粮食的品质和风味。每亩土地使用本发明的肥料的量为60-100克，是目前国内外使用量较少的高效复合生物肥料之一。

每亩使用量为80-200克。在本发明高效复合生物肥料中加入120倍的自来水和6倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化28小时，然后连同化肥（按照上年使用量的50%）洒入土壤中。最好作基肥，每年使用1-3次。

具体实施方式：

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

1、菌剂培养制备：

枯草芽孢杆菌剂培养制备：从斜面转接培养枯草芽孢杆菌，逐级扩培后的种子液转接入发酵罐中，发酵完毕发酵液经低温负压真空浓缩到原体积的40-50%，得到菌浓缩液。添加载体：向浓缩液中添加混合好的载体，混合均匀；浓缩液与载体的重量比为0.5-0.7:1，载体组成为：CaCO₃20-40份，糊精10-20份。流化床干燥，干燥温度50℃。

黑曲霉培养物制备：菌种培养，固体发酵培养：孢子液接种到固态发酵培养料中，26-35℃培养至菌丝长满培养料，低温流化床干燥，粉碎干燥物；

本发明提供的产耐高温α-淀粉酶的菌株具体为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）Li-2013-02。该菌株已于2013年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号），保藏号为CGMCC No.7926。

所述菌株特点如下：

所述菌株在固体平板上菌落颜色为乳白色，表面干燥不透明，边缘整齐，为具有运动性的好氧菌。镜检为长杆状，革兰氏染色呈阳性。该菌可利用柠檬酸盐，硝酸还原、V-P实验成阳性。

所述枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）Li-2013-02由一株保藏于本实验室的产耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌Li-2013经紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变筛选获得，具体筛选步骤如下：

（1）菌悬液的制备

将在平板划线分离后长出的Li-2013单菌落接入种子培养基中，100r/min，40℃培养12h后，取1mL培养液离心后用生理盐水洗涤两次，并重悬与9mL生理盐水中。

（2）紫外线-氯化锂-硫酸二乙酯复合诱变