[发明专利]一种芳基硫酸酯酶的生产菌株及其应用有效
申请号: | 201310745723.X | 申请日: | 2013-12-26 |
公开(公告)号: | CN103710288A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 付晓婷;王志朋;王雪艳;林洪;许加超;高昕 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/16;C12P19/04;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硫酸酯酶 生产 菌株 及其 应用 | ||
1.一种生产芳基硫酸酯酶的菌株,其特征在于,所述的菌株保藏编号为CCTCC NO:M2013613。
2.权利要求1所述的菌株在生产芳基硫酸酯酶中的用途。
3.一种芳基硫酸酯酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:发酵培养权利要求1所述的菌株,然后从菌体中分离纯化芳基硫酸酯酶。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的从菌体中分离纯化芳基硫酸酯酶具体是:收集菌体,用0.05M/L、pH=7.2的Tris-HCl缓冲液复溶菌体,冰浴条件下进行功率为200w的超声细胞破碎,离心取上清,得到胞内酶液;取胞内酶液加入硫酸铵至其终浓度为20%,静置6h,4℃、10000r/min离心10mim,弃沉淀取上清,上清加入硫酸铵至其终浓度为60%,静置12h,4℃、10000r/min离心10mim,弃上清取沉淀;沉淀用0.05M/L、pH=7.2的Tris-HCl溶解,4℃下用30KD的透析袋透析12h;之后用50KD的超滤膜超滤浓缩即得酶液。
5.一种生产高凝胶强度、低电内渗琼胶的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)培养权利要求1所述的菌株并分离纯化得到芳基硫酸酯酶;
b)取琼胶粉,加入去离子水并调节pH至9,再加入步骤a)的芳基硫酸酯酶,在45℃下进行酶解反应。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的琼胶粉是石花菜琼胶粉和/或江蓠琼胶粉。
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