[发明专利]一种红细胞裂解液及其应用无效
申请号: | 201310746148.5 | 申请日: | 2013-12-30 |
公开(公告)号: | CN103789298A | 公开(公告)日: | 2014-05-14 |
发明(设计)人: | 戴立忠;唐瑶;吴康 | 申请(专利权)人: | 湖南圣湘生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建;欧颖 |
地址: | 410012 湖南省长*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红细胞 裂解 及其 应用 | ||
1.一种红细胞裂解液,其特征在于,所述裂解液包含以下组分:4.5~5.5mmol/L的氯化钠、0.8~1.2%(v/v)的曲拉通100、300~340mmol/L的葡萄糖和0.008~0.012mol/L的三羟甲基氨基甲烷。
2.根据权利要求1所述的红细胞裂解液,其特征在于,所述氯化钠的浓度为5mmol/L,所述曲拉通100的浓度为1.0%(v/v),所述葡萄糖的浓度为320mmol/L,所述三羟甲基氨基甲烷的浓度为0.01mol/L,余量为无菌水。
3.一种如权利要求1或2所述红细胞裂解液的制备方法,其特征在于,在无菌水中加入上述四种组分,然后加无菌水定容至所需体积,充分混匀溶解;再使用氢氧化钠或盐酸溶液调节所得溶液的pH值至7.8~8.6,优选8.0~8.4,更优选8.2;最后灭菌2~30分钟,优选高压灭菌5~15分钟,即得到所述红细胞裂解液。
4.如权利要求1或2所述的红细胞裂解液或如权利要求3所述方法制备得到的红细胞裂解液在裂解全血样本中的红细胞并分离得到白细胞中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:
1)向全血中加入红细胞裂解液,充分震荡混匀,得到红色混合物;
2)对上述混合物进行离心分离,去上清,留下的白色沉淀物即为白细胞。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤1)中全血与红细胞裂解液的体积比为1:1~5。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤2)中离心分离的转速为10000~13000转/分钟,离心分离的时间为1~3分钟。
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