[发明专利]2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′ -二羟基二苯甲酮、其制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物药物领域，具体涉及2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′ -二羟基二苯甲酮及其制备方法，本发明还公开了其抗过敏的用途。

背景技术

过敏性鼻炎、哮喘、特发性皮炎、结肠炎、食物过敏、药物过敏等过敏性疾病是一类常见病，随着感染性疾病的控制和工业化程度的提高，过敏性疾病的发病率在全世界范围内呈逐年增高趋势，已成为各国政府高度关注的全球健康问题。西医目前尚未完全清楚本病病因，中医药在防治过敏性疾病方面有其优势特色，尤其在缓解病情、防止复发、维持病情长期、稳定、提高患者的生存质量等方面有良好效果，但对其有效性的科学阐释尚不充分。因此，从资源丰富的中药中寻找新型抗过敏药物，对于过敏性疾病的防治具有现实意义和广阔前景。中国药科大学中药复方实验室前期研究中发现，2-O-α-L-鼠李糖-4,6,4′ -三羟基二苯甲酮具有明显的抗过敏作用。但二苯甲酮糖苷的天然来源和种类有限，成本高，利用二苯甲酮类苷元的微生物糖基化修饰少见报道。

微生物转化是利用微生物产生的特异酶对外源性化合物进行结构修饰的特定生化反应。微生物转化具有高度的立体结构选择性，能专一地催化特定的反应、无需繁琐的保护与脱保护操作，具有高效、环保的优点，是天然活性化合物进行结构修饰的一种有效方法。若在含有多个羟基的二苯甲酮类化合物中引入糖基可以增加二苯甲酮类糖苷的种类，进而筛选出更多有活性甚至活性更高的化合物。

发明内容

本发明公开了结构式I的化合物：

命名为2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′ -二羟基二苯甲酮。本发明同时也包括结构式I的化合物的溶剂化物。

它的¹³C-NMR数据为C(1) 111.8，C(2) 158.4，C(3) 95.0，C(4) 164.3，C(5) 96.9，C(6) 159.1，C(7) 197.0，C(1’) 138.5，C(2’) 133.5，C(3’) 116.0，C(4’) 164.0，C(5’) 116.0，C(6’) 133.5，与2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮¹³C-NMR数据相比较，可以确定其母核为2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮，通过化学位移中的变化可确定糖是连在C₂位上。另外还有6个葡萄糖碳信号，分别为GLC(1) 102.6，GLC(2) 74.8，GLC(3) 77.9，GLC(4) 71.3，GLC(5) 78.3，GLC(6) 62.6。其单独还有一个甲氧基碳信号为: C_4-OMe 55.9。

药理试验证明，本发明的式I化合物具有优异的抗过敏效果。

    本发明的式I化合物优选用生物转化方法以2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮为底物进行转化制备，方法如下：

      

为了寻找适宜转化2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮成2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′ -二羟基二苯甲酮的菌种，本发明共筛选了多个菌种，结果发现，保藏号为NRRL1086菌种对2,6,4′-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮具有较强的转化能力（见表2）。

筛选所用液体培养基(PDA)：200克新鲜去皮马铃薯加沸水500ml煮15min后过滤，滤液加葡萄糖20g、KH₂PO₄ 3.0g、MgSO₄ 0.75g、Vb₁ 10.0mg，加蒸馏水定容至1.0L，加NaOH或HCl调pH值至6.0，150ml三角烧瓶每瓶分装30ml液体培养基，121℃、0.15MPa灭菌20min。

筛选菌种时，保存菌种所用斜面培养基是在上述液体培养基加入1.5%的琼脂，15ml具塞试管每管5ml，121℃、0.15MPa灭菌20min冷却后制成。

菌种的保存与活化：菌种活化采用两步活化法，参见：Nair,M.S.R.,and Basile,D.V.Bioconversion of artenium B to artmisinn.天然产物杂志（Jounal of Natural Products）1993,56(9):1559。先将菌种接种于液体培养基，28℃180r/min旋转培养24-48h后，转接于另一液体培养基，接种量1-5%（V/V），同条件培养24h后加样。