[发明专利]褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用

权利要求书

1.褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用，其特征在于，所述细胞外基质生物材料的制备步骤为先在普通细胞培养基材上体外培养外源细胞并诱导外源细胞分泌基质，再脱细胞处理；所述外源细胞为骨髓间充质干细胞。

2. 根据权利要求1所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。

3. 根据权利要求1或2所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用，其特征在于，所述骨髓间充质干细胞取自人源、猪源、鼠源或兔源。

4. 根据权利要求1或2所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用，其特征在于，所述诱导外源细胞分泌基质时使用的诱导培养液组成为：培养基α-MEM 80~90%体积比，胎牛血清10~20%体积比，抗生素10~200 U/mL，腺嘌呤0.2~0.25 mM，刺激因子组分；所述所述刺激因子组分由抗坏血酸10~100μg/mL，脯氨酸20~60μg/mL，地塞米松100nM~1μM中的一种或几种组成。

5. 根据权利要求1或2所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备促进间充质干细胞成骨分化药物中的应用，其特征在于，所述脱细胞处理为先加入含有氨水和Triton X-100的脱细胞处理液处理，再加入脱氧核糖核酸酶处理，所述脱细胞处理液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有Triton X-100 1~5%体积比和氨水0.8~5%体积比，所述脱氧核糖核酸酶溶液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有500~800 U/mL脱氧核糖核酸酶。

6. 褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备治疗骨疾病药物中的应用，其特征在于，所述细胞外基质生物材料的制备步骤为先在普通细胞培养基材上体外培养外源细胞并诱导外源细胞分泌基质，再脱细胞处理；所述外源细胞为骨髓间充质干细胞。

7. 根据权利要求6所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备治疗骨疾病药物中的应用，其特征在于，所述骨髓间充质干细胞取自人源、猪源、鼠源或兔源。

8. 根据权利要求6或7所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备治疗骨疾病药物中的应用，其特征在于，所述骨疾病为骨关节炎症、骨缺损或骨创伤。

9. 根据权利要求6或7所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备治疗骨疾病药物中的应用，其特征在于，所述诱导外源细胞分泌基质时使用的诱导培养液组成为：培养基α-MEM 80~90%体积比，胎牛血清10~20%体积比，抗生素10~200 U/mL，腺嘌呤0.2~0.25 mM，刺激因子组分；所述所述刺激因子组分由抗坏血酸10~100μg/mL，脯氨酸20~60μg/mL，地塞米松100nM~1μM中的一种或几种组成。

10. 根据权利要求6或7所述褪黑素协同细胞外基质生物材料在制备治疗骨疾病药物中的应用，其特征在于，所述脱细胞处理为先加入含有氨水和Triton X-100的脱细胞处理液处理，再加入脱氧核糖核酸酶处理，所述脱细胞处理液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有Triton X-100 1~5%体积比和氨水0.8~5%体积比，所述脱氧核糖核酸酶溶液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有500~800 U/mL脱氧核糖核酸酶。